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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃
- 保质期:
90天
- 英文名:
pX330S-2
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pX330S-2
货号:KM102856
图谱:微客服
宿主:哺乳细胞
用途:基因敲除
片段类型:CRISPR,Cas9,sgRNA
片段物种:空载体
原核抗性:Spe
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验9 in this chapter should be relevant for thesefuture efforts as well. 2 Materials 2.1 Molecular Biology Reagents 1. Backbone plasmids: pX330 (U6-chimeric guide RNA + CBh-SpCas9 backbone, Addgene ID 42230), pX335 (U6-chimericguide RNA + CBh-SpCas9n
CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具,今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作,仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒,如下图所示: 酶切系统 37 ℃, 3 hr;Run 1% gel,回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端,以利于下游 oligo 退火产物的连接;酶切时请充分,且绝对不能加 CIP 处理
] 。在上述基础上,我们进一步优化了分离方法,并将其用于本实验室大规模的叶绿体分离和蛋白质组分析工作中 [16] 。这种方法没有进行过叶绿体蛋白质输入活性的测试,但是本方法具有产率高,污染低的优点,尤其适合于叶绿体的蛋白质组分析。关于用于体外蛋白质输入活性试验的叶绿体分离方法,可以参考其他的一些报道 [17] 。2. 材料 ( 1 ) 介质 A ( 匀浆缓冲液,见注释 1):50 mmol/L HEPES-KOH ( pH 8.0) 、330 mmol/L 山梨醇、2 mmol/L EDTA
技术资料









