- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM102502
- 2025年07月14日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃
- 保质期：
90天
- 英文名：
SP-dCas9-VPR
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：SP-dCas9-VPR
货号：KM102502
图谱：微客服
宿主：哺乳细胞
用途：干扰沉默
片段类型：CRISPR,Cas9
片段物种：
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光标记：
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文献和实验会怎样"用 CRISPRa。 --- 一、机制差异决定了两者能回答的问题不同 过表达质粒（cDNA / ORF） 外源启动子（CMV、EF1α 等）驱动，表达量与内源调控完全脱钩； 通常只包含单一 CDS，不含内含子和 UTR； 表达量可达到内源的几十到几百倍； 可携带标签（FLAG、HA、GFP）方便检测。 CRISPRa（dCas9-VP64 / VPR / SAM / SunTag） 失活 Cas9（dCas9）融合转录激活域，被 gRNA 引导至靶基因启动子区； 激活的是内源位点，转录本包含完整的内含
体（P65 和 HSF1 都是强激活域）； modified sgRNA（sgRNA 2.0）：在 gRNA 骨架上插入 MS2 发夹序列，作为 MS2 融合蛋白的对接位点。 工作时，dCas9-VP64 通过 gRNA 结合到靶基因启动子，sgRNA 上的 MS2 发夹再招募 MS2-P65-HSF1，形成多激活域协同作用，激活强度远高于单独的 dCas9-VP64。 其他可选的激活系统还有 VPR（VP64-p65-Rta 三联融合）、SunTag（串联表位招募多拷贝激活域）等，各有强弱，SAM
1.1 利用启动子探针载体筛选启动子启动子探针型载体是一种有效、经济、快速分离基因启动子的工具型载体，包含2个基本部分：转化单元和检测单元。其中，转化单元含复制起点和抗生素抗性基因，用于选择被转化的细胞；检测单元则包括1个已失去转录功能且易于检测的遗传标记基因以及克隆位点。利用启动子探针载体筛选启动子的过程为，先选用1种适当的限制性核酸内切酶消化切割染色体DNA，然后将切割产生的DNA限制片段群体与无启动子的探针质粒载体重组，并按照设计的要求使克隆的片段恰好插在紧邻报告基因的上游位置；随后再把重组混合
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