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-80℃
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90天
- 英文名:
pAO815
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pAO815
货号:KM101100
图谱:微客服
宿主:酵母菌
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:
原核抗性:Amp
真核抗性:HIS4
荧光标记:
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文献和实验体质粒,所以一般用整合型载体作为外源基因的表达载体,目前常用的表达载体多是美国Invitrogen公司开发构建的。P.pastoris既有分泌表达型的,又有胞内表达型的。常用的表达载体主要有:pPIC9,pPIC9K,pHILS,pAO815,pHILD2和pPICz等,其中pPIC9,pPIC9K和pHILS为分泌型表达载体,而pAO815,pHILD2和pPICz为胞内型表达载体,不同载体除具有各自特殊的基因组件外,还具有一些共同的序列,如这些载体都包括一个表达盒(cassette)和一
。是已知最强的启动子,它可以使外源蛋白质的表达量达到宿主菌总蛋白的5%~40%。另外某些整合型载体还含有外分泌信号肽,表达产物可以被分泌到培养基中,利于纯化处理;对于C末端带多聚组氨酸(6×His)的整合型载体,可以用树脂纯化表达蛋白质。常见整合型载体如pPIC3KPIC9K、pPICZ、pAO815、pPICZ和 pGAPz。 构建好的巴斯德毕赤酵母表达载体被相应的内酶消化 变成线状,用电穿孔法、LiC1-PEG法或原生质体法将线性化载体转化到宿主菌中。线性化的置不同使载体有两种方式与宿主菌染色
1 )和转录终止子(3′AOX1 )构建成整合型表达载体。PAOX1 是一个极强的启动子,醇氧化酶的产量最高可占甲醇酵母中可溶性蛋白质的30%[2] ,所以能使外源蛋白质在它的控制下高效产生。其次,在载体中加入酿酒酵母的分泌信号和前导肽序列(α因子)构建分泌型载体,一方面可以减轻宿主细胞的代谢负荷,另一方面可以减少宿主细胞蛋白水解酶对外源蛋白质的降解,pPIC9K、pMETαA、B、C均为此类载体。此外,使多拷贝目的基因整合入甲醇酵母染色体,形成多个表达单元,产生高产的菌株,此类载体有pAO815
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