- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM101080
- 2025年07月04日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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-80℃
- 保质期：
90天
- 英文名：
pBiFC-VN155(I152L)
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：pBiFC-VN155(I152L)
货号：KM101080
图谱：微客服
宿主：哺乳细胞
用途：双分子荧光
片段类型：BIFC
片段物种：空载体
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光标记：
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文献和实验连接酶 0.1Weiss单位 ５mmol/L ATP 1μl 于16℃温育１－４小时 10xT4噬菌体ＤＮＡ连接酶缓冲液 200mmol/L同Tris.Cl(pH7.6) 50mmol/K MgCl2 50mmol/L二硫苏糖醇 500μg/ml牛血清白蛋白（组分Ｖ.Sigma产品）（可用可不用） 该缓训液应分装成小份，贮存于－20℃。 另外，再设立两个对照反应，其中含有（１）只有质粒载体；（２）只有外源ＤＮＡ片段。如果外源ＤＮＡ量不足，每个
Ｔ４噬菌体ＤＮＡ连接酶不同于大肠杆菌ＤＮＡ连接酶，它可以催化平端ＤＮＡ片段的连接（Sgaramella和Khorana,1972;Sgaramella和Ehrlich,1978），由于ＤＮＡ很容易成为平端，所以这是一个极为有用的酶学物性。有了这样的物性，才能使任何ＤＮＡ分子彼此相连。然而，相对而言，平端连接是低效反应，它要求以下４个条件： １）低浓度（0.5mmol/L）的ATP(Ferretti和Sgaranekka,1981）。 ２）不存在亚精胺一类的多胺。 ３）极高
℃。 另外，再设立两个对照反应，其中含有（１）只有质粒载体；（２）只有外源ＤＮＡ片段。如果外源ＤＮＡ量不足，每个连接反应可用50-100ng质粒ＤＮＡ，并尽可能多加外源ＤＮＡ，同时保持连接反应体积不超过10μl。可用至少３种不同方法来测定Ｔ４噬菌体ＤＮＡ连接酶的活性。大多数制造厂商（除New England Biolabs公司外）现在都用Weiss等，１1968)对该酶进行标化。１个Weiss单位是指在37℃下20分钏内催化１mmol32P从焦磷酸根置换到[γ,β-32P]ATP所需酶时
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