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- 详细信息
- 文献和实验
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-80℃
- 保质期:
90天
- 英文名:
pET30a-EcoRV
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pET30a-EcoRV
货号:KM101651
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:空载体
原核抗性:Kan
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验1.4 利用载体或接头的染色体步行技术 克隆 基因启动子 这类方法的第一步都是酶切基因组 DNA ,连接载体或接头,既可以用pUCl8等质粒载体,也可以使用λ DNA 等噬菌体载体,只要选用的载体带有合适的酶切位点;同样根据实验需要,接头既可以是双链也可以是单链,然后根据基因组 DNA 序列设计的特异引物和载体的通用引物或接头序列进行扩增。 1.4.1 利用载体的PCR Shyamala等利用的单特异性引物PCR (SSP-PCR )对以小鼠
1.1 利用启动子探针载体筛选启动子启动子探针型载体是一种有效、经济、快速分离基因启动子的工具型载体,包含2个基本部分:转化单元和检测单元。其中,转化单元含复制起点和抗生素抗性基因,用于选择被转化的细胞;检测单元则包括1个已失去转录功能且易于检测的遗传标记基因以及克隆位点。利用启动子探针载体筛选启动子的过程为,先选用1种适当的限制性核酸内切酶消化切割染色体DNA,然后将切割产生的DNA限制片段群体与无启动子的探针质粒载体重组,并按照设计的要求使克隆的片段恰好插在紧邻报告基因的上游位置;随后再把重组混合
E.Coli RNaseH 0.8m 加无核酸酶水至总体积100ml 余下步骤同本章第四节一(二)2-12 步及(三)和(四)。 思考题: 1. 为什么mRNA 提取是cDNA 合成成败的关键? 2. 试比较自导引导法和置换合成法合成cDNA 的优缺点。 第五章重组质粒的连接、转化及筛选 第一节概述 质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA 片段(<10kb)且结构简单,质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆
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