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90天
- 英文名:
pEGFP-EcoRV
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pEGFP-EcoRV
货号:KM101655
图谱:微客服
宿主:哺乳细胞
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:空载体
原核抗性:Kan
真核抗性:Neo/G418
荧光标记:
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文献和实验ono1180 求助各位同道: 我想过表达一个基因,想选用一个质粒载体连接此基因再转染入细胞,选用的载体需要有绿色荧光标记,而且能筛选出稳定转染的细胞系,上网查了一下觉得pEGFP系列的好像符合我的要求。 请问这个载体怎么样,大家还有什么载体觉得挺好,请指教,感谢了。 xiaokangkuaile 我用的是pEGFP-C1表达载体,但我的目的基因对GFP表达有影响,转染效果很差
1.4 利用载体或接头的染色体步行技术 克隆 基因启动子 这类方法的第一步都是酶切基因组 DNA ,连接载体或接头,既可以用pUCl8等质粒载体,也可以使用λ DNA 等噬菌体载体,只要选用的载体带有合适的酶切位点;同样根据实验需要,接头既可以是双链也可以是单链,然后根据基因组 DNA 序列设计的特异引物和载体的通用引物或接头序列进行扩增。 1.4.1 利用载体的PCR Shyamala等利用的单特异性引物PCR (SSP-PCR )对以小鼠
引物就得把下游引物上的终止密码子去掉,不要辛辛苦苦的一路做下来结果根本不表达融合蛋白,你就死了。C1 质粒,注意 frame,要是移码了,你也死了。而且 PEGFP 系列有 1、2、3,要弄清楚别弄窜了。 一句话,要看懂你的图谱!再多一句,PEGFP 的 Xba 1 和 Bcl 1 位点不能用。 注意在设计酶切位点的时候要加保护碱基(如果用 T 载体可以不用在意)。酶切位点设计也有一定的讲究,我的原则是,能用粘端就用粘端,实在不能用的就用只好用一些常用的平端酶,如 EcoRV
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