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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃
- 保质期:
90天
- 英文名:
pBAD30
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pBAD30
货号:KM101602
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:空载体
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验自杀性质粒载体:一般用于基因突变。将突变的目的基因克隆到自杀性质粒载体上,通过接合等使其进入宿主,由于在宿主菌中不存在复制基因启始所需的复制蛋白(如Pi蛋白等),其无法复制,在外界选择性压力的作用下,自杀性质粒载体所携带的突变基因就与宿主染色体上的野生型发生基因发生二次同源重组,产生了带有突变的突变株;而质粒载体自身由于自杀性特性连同染色体上原有的野生型基因一起随着细菌的传代从菌体内消失。至于一次重组的突变株,可借助质粒上的某些选择基因(如sacB,sucrose敏感)筛除。整合载体:将目的
1 、将转染后的细胞按照一定的比例接种到 6 孔板中(一般选用 1 : 10 和 1 : 100 两个梯度),分别采用 1200 m g/ml , 1000 m g/ml 和 800 m g/ml 的 G418 进行筛选; 以转染携带 EGFP 质粒载体的细胞作为阳性对照,以未转染质粒载体的细胞作为阴性对照; 2 、每 3 ~ 4 天换液一次; 3 、筛选 20 ~ 30 天,即可得到稳定表达细胞株; 4 、传代后,以一定的 G418 浓度
非病毒载体介导的基因治疗有许多优点,但就目前大多数表达体系而言普遍存在外源基因表达水平低而短暂等问题为了使外源基因稳定持续表达,必须对质粒DNA 进行改造。附着体质粒载体(episomal vector)可以使外源基因以附着体形式复制,分离到子代细胞,从而使基因高效持续表达,是种新型的非病毒表达载体 。 我们构建了以EB病毒(Epstein Barr virus,EBV)复制子(EBV replicon,EBVR)为基础的附着体质粒载体,并将报告基因增强型绿色
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