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文献和实验动物细胞转染,或者是昆虫细胞转染,FuGENE HD 都同样胜任!如果你的实验同时涉及这两类不同类型的细胞,你再也不需要另外购买、另外设计另一套转染方案了! ――对细胞更低毒性 ?当然要啦!可不要象脂质体转染试剂那样转染一次死伤大半,残存的转染细胞形态尽失。FuGENE HD 更低的细胞毒性,不单使得转染程序简便,更令大部分转染细胞保持正常的细胞形态,伤害越小当然效果越好! ――转染得到更高的蛋白表达 ?绝对要的!转染效率高但表达效率低那有啥意思?!转染,自然就希望得到更好
。 为保证将被转染细胞的质量,罗氏应用科学部建议使用新近从ATCC®获得的细胞系。 分裂细胞相比较非分裂细胞—分裂细胞往往要比静止细胞更易于摄取并表达外源DNA。因此对大多数转染操作而言,细胞都在转染当天或前一天种板。同样重要的是细胞在种板进行转染时不应处于生长过度的状态。由于FuGENE® 6和HD转染试剂对于细胞作用温和,可同时进行贴壁细胞的种板和转染。 此外,还常用促有丝分裂刺激物(如,病毒转化,生长因子,条件培养基,以及滋养细胞)来活化原代培养细胞。
)。 图18 AAV-hSyn-DIO-EGFP-P2A-EGFPf 在小鼠中的标记效果,参考文献:Front Cell Neurosci, 2020, 14:145。 实例二:rAAV 递送基因编辑工具,用于亨廷顿舞蹈症的基因治疗 亨廷顿舞蹈症(Huntington’s disease, HD)是一种常染色体显性遗传的神经退行性疾病,由亨廷顿基因(Huntingtin, HTT)一号外显子区域中的 CAG 重复异常扩增(超过 36 次)所导致。突变 HTT 基因编码的蛋白(mHTT)会发生错误
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