- ￥71
- 麦格
- 中国
- MI7019-100mL
- 2026年01月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
瓶身或者咨询
- 保质期：
COA
- 英文名：
MAIGE
- 库存：
999
- 供应商：
麦飞生物
- CAS号：
无
- 规格：
100mL
产品简介：
细胞冻存液以进口 FBS、DMSO 为主要原材料配制，适用于是各种哺乳动物原代
细胞、传代细胞和杂交瘤细胞等的冻存保种。
本产品为即用型试剂，储存稳定，使用方便，细胞存活率高。
使用方法:
细胞冻存步骤
1、 常规方法收集对数期的贴壁细胞或者悬浮细胞于试管中。
2、 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存的细胞数。
3、 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中，1000rpm 离心 5 分钟，收集培养细
胞沉淀，彻底弃去离心管中的上清液。
4、 加入适量的本冻存液于离心管中，使细胞浓度约为 1*106-1*107/ml。轻柔地
混匀细胞，制成细胞混合液。
5、 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中。
6、 密封标记后按常规操作流程依次经 4℃，-20℃，-80℃直至液氮罐或用程序降
温仪逐级降温冻存。
冻存细胞复苏步骤
1、 从冰箱中取出冻存的细胞，立即置于 37℃水浴槽中快速解冻。
2、 待冻存管中的细胞混合液完全融化后，立即加入 1ml 细胞培养基于冻存管中
与细胞混合，将其中的混合液移至含有约 5ml 该细胞培养基的离心管中，1000rpm 离
心 5 分钟，收集冻存细胞沉淀，移去上清液（注意勿将细胞沉淀倒掉）。
3、 加入适量的新鲜培养基，使用移液管缓缓加入细胞沉淀中，轻柔混匀，将混
匀好的细胞移至事先准备好的培养容器中。
4、镜检观察，待细胞状态恢复后可进行其他研究或者培养处理。
注意事项：
1、 取用冻存液均要在超净工作台内无菌操作 。
2、 初次使用融化后可在 2-8℃保存至少 1 个月，少量蛋白析出不影响冻存效果。
3、 冻存时从室温可快速降到 0℃，再降温时一般按每分钟降温 1～2℃，待降至
-80℃以下时可放入液氮中，在液氮中细胞可保存数年或更长时间.
4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件：
-20℃保存，2 年有效。
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文献和实验。 4、培养细胞时，如何去除血清来源的外泌体？ 多数情况下，细胞在体外培养时需要血清，而血清中一般都含有外泌体，为避免血清对细胞外泌体的污染，可采用以下两种方法： 将细胞培养用的血清通过 1×105g 超速离心 >10 h 以去除血清外泌体； 选择无血清完全替代培养基进行细胞培养。 5、无外泌体血清（或者外泌体专用培养基）在什么时候使用？ 使用无外泌体血清培养基：细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后，细胞汇合度在60% - 70% 时，移去原有含血清的培养基，换成新鲜的无外泌体血清培养基，继续
第一步细胞培养：外泌体来自于细胞，必须先从源头抓起，高质量的细胞及上清液产出高质量的外泌体。 收集上清的细胞培养原则：在细胞健康正常生长的前提下，尽可能的减少血清外泌体或是不使用血清。 培养条件 优点 缺点 1 含血清的完全培养基 ✘ 血清中含有大量异源外泌体 2 含去外泌体血清的培养基 ✔ 营养相对丰富 去外泌体血清难以做到 100% 的去除的，因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体 3 基础培养
一段时间的生长后收集细胞上清液。但是这两种方法都会存在一定的不足的，去外泌体血清难以做到 100% 的去除的，因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体，而外泌体专用无血清培养基，也不是适合所有的细胞，常见的肿瘤细胞培养通常都可以维持生长，而那些血清培养都困难的细胞就难以通用了，所以也需要一些预实验的摸索。 还有，那些 DMEM、1640、F12 的基础培养基是否可以替代血清或者外泌体专用无血清培养基呢？这样是不行的。因为细胞在这些基础培养基的环境下，是处于饥饿状态的，细胞会将培养
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