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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
鹿森生物
- 现货状态:
现货
- 保修期:
见标签
- 规格:
1米/卷
透析袋使用方法:
1、先带好手套,把透析袋剪成适当长度(10cm左右)的小段,长度可以根据需要,但必须有足够的容器来容纳。
2、用蒸馏水彻底清洗透析袋,两头用手微微捏住,检查是否有漏袋。透析袋保存液含有防腐剂,对活性物质有抑制作用,至少用蒸馏水(纯水、去离子水均可)反复冲洗三次,有时间最好用蒸馏水浸泡30分钟再使用。
3、不使用的透析膜放回储存液中,密封保存,接触透析膜过程中必须戴手套。
4、使用时,一端用透析袋夹子夹紧,灌满水后,用手指适当加压,检查不漏,另一头也同样反复一次,以免夹子不够紧。然后装入样品,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋胀破。装完样品后,用夹子夹紧袋口,即可进行透析。为了加快透析速度,除多次更换透析缓冲液外,还可使用磁力搅拌器。透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。根据样品浓度决定透析时间,也可以过夜透析,透析时间在24~48小时为宜。用线吊着透析袋,使透析袋处于悬浮状态,也可以加速透析速度。
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文献和实验电镜技术的发展,会有更多的膜蛋白结构得到解析,助力后续的功能研究和药物发现。 有了冷冻电镜这把利器之后,真正制约膜蛋白研究的其实是样品的制备。 常规的膜蛋白制备流程如下: 图 1. 常规的膜蛋白制备流程图 特点是: 蛋白含量低 收率低 活性易降低 纯化过程需要优化 去垢剂 天然表达的膜蛋白含量极低,很难纯化。就算是重组表达体系,生产出的膜蛋白通常具有细胞毒性,因此表达量也远低于常规重组蛋白。在整个纯化过程中都需要选择合适的去垢剂才能使膜蛋白本身保持空间构象和活性。 去垢剂可分为三种: 表
,marker分开的差不多了,方便你在内参和目的条带位置敷膜了即可。问③非常感谢楼主的经验分享。我在跑12KD左右的蛋白,半个月只跑出来一次,而且效果不怎么好。打算明天用你的方法验证一下,届时回来反馈。还有就是顺便问一下,全部使用新配置电解液和两版之间使用新电解液外围使用旧电解液效果有差别么?浓缩胶和分离胶体积1:1会不会比1:2效果更好呢?答③我个人尝试后感觉,只要两个玻璃板之间的空间用新电泳液就ok了,效果没什么区别。至于浓缩和分离的体积改为1:1,我觉得当然可以,不过那样的话浓缩胶电泳的时间怕是会更长
的念念不忘,随着冷冻电镜技术的发展,会有更多的膜蛋白结构得到解析,助力后续的功能研究和药物发现。 有了冷冻电镜这把利器之后,真正制约膜蛋白研究的其实是样品的制备。 常规的膜蛋白制备流程如下: 特点是: 蛋白含量低 收率低 活性易降低 纯化过程需要优化 去垢剂 天然表达的膜蛋白含量极低,很难纯化。就算是重组表达体系,生产出的膜蛋白通常具有细胞毒性,因此表达量也远低于常规重组蛋白。在整个纯化过程中都需要选择合适的去垢剂才能使膜蛋白
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