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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
52
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠主动脉瓣膜间质细胞 | T25瓶 | LZ-YX9985 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| S-180(小鼠肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 | 白鲢尾鳍细胞系;SCF 人成纤维细胞,Hs 578T细胞 Acc-3(涎腺腺样囊性癌细胞) |
| CSF1R Others Mouse 小鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 人细胞裂解液 (阳性对照) | RNA结合蛋白20抗体 |
| Y1细胞,肾上腺皮质细胞 人胰腺癌细胞,MIApaca-2细胞 CM-M008小鼠支气管成纤维细胞完全培养基100mL | 0脂酰基醇蛋白聚糖-4抗体 |
| 大鼠肾系膜细胞;RMC | 果胶酶抑制蛋白18抗体 |
| tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-3A1 | 细胞核因子/k基因结合核因子抗体 |
| 成纤维细胞培养基FM-prf | 蛋白激酶受体相关1β抗体 |
| IL36RN Protein Human 重组人 IL1F5 / IL36RN 蛋白 | 神经内分泌肽QRFP抗体 |
| 扁桃体上皮细胞培养基TEpiCM-prf | 枯草溶菌素转化酶1抑制剂抗体 |
| L W-3A 小鼠皮下结缔组织细胞 | 抑制素βC抗体 |
| 肾近曲管状上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) | 半氨酸蛋白酶抑制剂样蛋白1抗体 |
| 猪肾细胞;PK(15) | 破伤风毒素轻链抗体 |
| PC-12细胞,大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 人肾癌细胞,KC细胞 直肠癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)/1ml | 基质金属蛋白酶20 |
| 大鼠主动脉瓣膜间质细胞B16-F10, 小鼠黑色素瘤高转移细胞 | 锌指蛋白749抗体 |
| CM-H067人肾系膜细胞完全培养基100mL | 分选连接蛋白1抗体 |
| 人肾上腺皮质癌细胞;SW-13 | 酸性核糖体0蛋白大亚基P0抗体 |
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文献和实验材料与方法: 材料 : 培养皿、培养瓶、烧瓶、试管,玻璃针等。 眼科剪、眼科镊、手术刀片。 5%CO2孵箱、PH计。 恒温水浴箱。 PMi1640培养基,D-Hank’s缓冲液 、胎牛血清,内皮生长因子(ECGF),青霉素,链霉素,戊巴比妥钠等。 方法: 1、取材:4~6wWistar大鼠, 大剂量2%戊巴比妥钠麻醉处死,将处死后的大鼠浸入75%酒精中,放入超净台。在无菌状态下剪开胸腹腔,分离胸主动脉,用2ml注射器从主动脉弓处向胸主动脉注入D-Hank’s液,驱除残血,取主动脉
实验材料: 1. 大鼠主动脉血管; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养用液:M199培养液或RPMI1640培养液(含20%小牛血清,pH7.2);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:1,V:V)混合消化液;D-Hanks液、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素;1%明胶溶液; 4. 培养器具:培养瓶或皿、白内障、眼科剪、镊子等; 培养方法: 1. 将大鼠
PriCells –正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit6、检测试剂:肌动蛋白
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