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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- CAS号:
39450-01-6
- 规格:
1g
产品概况
本产品来源于表达经过定点突变优化的林伯氏白色念球菌(Engyodontium album)蛋白酶 K 基因的毕赤酵母,具有比活性高、产量高及更广的温度/pH 值活性范围等优势。先进的蛋白质工程技术及两万八千升酵母平台有效单位成本,为生物医药研发与生产提供性价比最佳的蛋白酶 K。酵母高效表达和色谱纯化保证了产品的纯度,本产品不含细菌内毒素,应用范围比天然蛋白酶 K 更广泛。蛋白酶 K 是现有蛋白酶中活性最高的品种,pH 活性范围为 4- 12,温度范围达 0-75℃,甚至在 SDS、尿素或 EDTA 存在的情况下依旧保持活性。蛋白酶 K 切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,可以降解所有蛋白质。
CAS No.: 39450-01-6
E.C.: 3.4.21.64
来源种属:
表达经过基因工程改造的白色念珠菌(Engyodontium album)蛋白酶 K 基因的毕
赤酵母
比活性值: ≥ 34 U/ mg protein
分子量: 29.3 kD
纯度: ≥ 95%(Native-PAGE)
产品性状: 白色冻干粉和无色或淡黄色透明液体
单位活性定义:
在 37ºC pH 7.5 条件下,每分钟可水解酪蛋白底物生成 1 µmol 酪氨酸的蛋白酶
K 的量定义为一个单位(U) 。每批次产品的酶活值见相应质检报告。
储运温度:
液体酶建议低温运输及保存。
固体酶可短期室温运输和储存.建议密封保存,储存温度低于 4ºC。
液体酶有效期为一年。打开包装使用后,如果在 2~8ºC 环境下放置超过一 周时
间,建议过滤除菌,防止微生物污染。
固体酶储存有效期为三年,打开包装后及时使用,避免受潮。
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文献和实验【交流】大家来看看我的ISH protocol!哪里有问题么?
microRNA 原位杂交 protocol 这个我是以exiqon的protocol为蓝本翻译过来的,有些小步骤上有修改。 1脱蜡水合 RT 二甲苯1*3min----二甲苯2x3min——无水乙醇1*3min——无水乙醇2*3min——96%乙醇浸入5min——70%乙醇5min——PBS 2-5min 2蛋白酶k 2ug/ml(临用前配置) 200ul 10min 37度 40ug/ml 蛋白酶k 1:20稀释于蛋白酶k buffer 3含
/RealTime PCR扩增的技术进步,很多样品的需求量大大减少,几百个纳克到几个微克足够,而最常见的离心柱型小量提取,正好可以提取几个微克到十几微克的样品。完全可以满足下游试验的需要。 2. 离心柱操作不使用苯酚,氯仿有毒害物质。方便快捷,裂解后配合蛋白酶K消化,过柱子,漂洗,洗脱,几个简单步骤就可以完成全部过程。适合于标准化高通量操作,对操作技巧要求低,即使初学者提取也可以得到稳定的结果。 3. 联合的蛋白酶K消化,和漂洗,可以确保了高纯度的可能性。是目前所有方法中,纯度最高的一种全血
0.1%羟基喹淋的苯酚[ 用0. 01mol/LTris.Cl(pH7.8)平衡]多次抽提以去除之。有几家公司出售氧钒核糖核苷复合物。 (三)Macaloid(硅藻上) Macaloid是一咱粘土,很多年前就发现它能吸附RNA酶,用缓冲液将其制成浆液,以0.015%(W/V)的终浓度溶解细胞。 这种粘土随同它所吸附的RNA酶可在后续的RNA纯化过程中(如酚抽提后)经离心去除。 三、破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法 用强烈变性如盐酸胍或硫氰酸胍溶液能迅速溶解蛋白质, 导致细胞结构破碎,核蛋白
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