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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
Keep in dark place,Sealed in dry,Room Temperature
- 保质期:
2年
- 英文名:
1,3-Di-Boc-2-(trifluoromethylsulfonyl)guanidine
- 库存:
999
- 供应商:
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号:
207857-15-6
- 规格:
10g
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文献和实验3~8ul 用于PCR扩增,或放-20℃保存. 蛋白酶K消化法除上述经典处理法外,亦可在蛋白K消化处理标本,经离心处理 后,吸取上清经95~97℃或煮沸10min灭活蛋白酶K后,直接作核酸模板用于PCR扩增. 如杂质较多,还可经酚:氯仿抽提后,即可用于PCR反应.此法蛋白质及其它杂质消除 彻底,Taq酶活性不受影响,具有良好的重复性与稳定性.但操作繁复,技术要求高. (二)直接裂解法: 标本(组织细胞,分泌物)加PBS或生理盐水离心洗涤后,加消化 裂解液20~50
(一)试剂准备1. CSB缓冲液:42mM柠檬酸钠;0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基,N甲基甘氨酸钠);0.2 mM β-巯基乙醇。2. 变性液:异硫氰酸胍(终浓度 4 M)25g、CSB缓冲液 33ml,混合直至完全溶解,可在65℃助溶。4℃保存备用。3. 2 M乙酸钠:pH 4.0。4. 异丙醇5. 无水乙醇、70%乙醇6. 酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)7. DEPC H2O:100ml ddH2O中,加入DEPC 0.1ml,弃分振荡,37℃孵育过夜。15
仿/异戊醇(CI)(24:1) 5) 异丙醇 ( -20℃存放) 6) DEPC-H2O (0.1%,V/V) 3 仪器 : 冰冻离心机,研钵 二、实验程序 1 大量提取 1) 取植物组织5g加入液氮充分研磨,转到一支预冷50mL的 离心管 中,顺序加入:15mL 异硫氰酸胍溶液,1.5mL 2M NaAc(pH4.0),15mL水饱和酚和3mL氯仿/异戊醇。混匀后置冰上15min。
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