佛波酯 PMA 16561-29-8

佛波酯 PMA 16561-29-8 佛波酯 PMA 16561-29-8
产品名称：佛波酯 PMA 16561-29-8
产品编号：A2697
中文别称 PMA,TPA,Phorbol ester,croton 佛波酯 PMAoil，PMA，TPA，佛波酯，巴豆油，12-O-十四烷酰基佛波醇-13-乙酸酯；佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯
英文别称 Phorbol 12-myristate 13-acetate
CAS 16561-29-8
分子式 C36H56O8
分子量 616.8
储存条件 -20℃ 避光保存
有效期 2年
溶解性 10mg/Ml in DMSO
来源 青霉菌
纯度 ≥98%
性状 结晶固体 包装 瓶
规格 1mg 5mg
PMA（同义名：TPA）是一种广泛用于体内外实验的佛波酯(phorbol ester) PKC激活剂。PMA结合PKC(Ki =2.6 nM)并激活其功能，在细胞和组织中都呈现出极其广的抑制谱。PMA可以抑制Fas诱导的细胞凋亡，但又可以诱导HL-60细胞的凋亡。PMA是一种高效的肿瘤促进剂，可以促进小鼠皮肤瘤的形成。尽管PMA毒性较强，但是在人体内仍显示出抗白血病和抗中性白细胞减少的活性。
使用浓度：
PMA的具体使用浓度请参考相关文献，并根据自身实验条件（如实验目的，细胞种类，培养特性等）进行摸索和优化。
Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) is a diester of phorbol and activates the signal transduction enzyme protein kinase C (PKC). It is used as a tumor promoter and to stimulate division of B-cells. With ionomycin, PMA induces the activation of many cell types to produce cytokines.
Description:
Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) is a diester of phorbol and activates the signal transduction enzyme protein kinase C (PKC). It is used as a tumor promoter and to stimulate division of B-cells. With ionomycin, PMA induces the activation of many cell types to produce cytokines.
Preparation and storage:
Soluble in organic solvents such as ethanol and DMSO. DMSO up to 100mM..
本产品可能不适合用于诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞。
生物活性 Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) 是一种佛波酯，是常用的 PKC 活化剂。[1-4]

In Vitro
为了检查PKC在p38MAPK磷酸化中的作用，用PKC活化剂PMA（100nM）刺激细胞，其模拟PKC的天然活化剂DAG与PKC的C1区的结合。在与αT3-1细胞中GnRH观察到的类似的两种细胞类型中观察到PMA的p38MAPK磷酸化，即缓慢的持续激活（分别在30分钟时为3.2倍和3.6倍）。由GnRH和PMA激活的PKC在p38MAPK磷酸化中起不同作用的矛盾发现可以通过PKC的差异定位来解释。 αT3-1细胞中p38MAPK磷酸化的基础，GnRH-和PMA-刺激是通过电压门控Ca2 +通道和Ca2 +动员的Ca2 +流入介导的，而在分化的LβT2促性腺细胞中，它仅通过Ca2 +动员介导[2]。

In Vivo
PMA是PKC激动剂，其逆转由5-羟基癸酸（5-HD）诱导的损伤。因此，mitoKATP的激活通过PKC途径保护SOD和MDA中的线粒体功能[3]。

细胞实验
αT3-1和LβT-2细胞在补充有10％胎牛血清（FCS）和L-谷氨酰胺2mM，青霉素和链霉素（100单位/ mL）的DMEM中在37℃加湿培养箱中培养5％CO2培养。 C。在同一培养基中血清饥饿为0.1％FCS，持续16小时。然后如所示，将GnRH和PMA添加一段时间。通常，αT3-1细胞通过ExGen 500或jetPRIME瞬时转染，而LβT2细胞仅通过jetPRIME转染试剂转染。对于显性阴性（DN）PKC的实验，用1.5μgp38α-GFP和3μg对照载体，pCDNA3或3μgDN-PKC构建体转染αT3-1细胞（在6cm平板中）。对于LβT2细胞，用4μgp38α-GFP以及9μg对照载体，pCDNA3或9μgDN-PKC构建体进行转染（在10cm平板中）。转染后约30小时，将细胞血清饥饿（0.1％FCS）16小时，然后用GnRH或PMA刺激，用冰冷的PBS洗涤两次，用裂解缓冲液处理，然后进行一次冻融循环。收获细胞;离心（15,000×g，15分钟，4℃）后，取上清液进行免疫沉淀实验[2]。

动物实验
大鼠[3]所有实验均用雄性Wistar大鼠（体重250-280g）进行。将125只Wistar大鼠随机分成7组。 （1）假手术组（n = 21）给予侧脑室注射0.9％生理盐水; （2）IR组大鼠（n = 21）在大脑中动脉闭塞（MCAO）前30 min给予侧脑室注射0.9％生理盐水; （3）在MCAO前30分钟，给予Carbenoxolone（CBX）组（n = 21）大鼠侧脑室注射CBX（5μg/ mL×10μL）; （4）在MCAO之前30分钟，给二氮嗪（DZX）组（n = 21）的大鼠腹侧注射DZX（2mM×30μL）; （5）对5-HD组（n = 21）的大鼠进行5-HD（100mM×10μL）的侧脑室注射，10分钟后，在MCAO前15分钟注射DZX; （6）给DZX + Ro组大鼠（n = 15）注射DZX侧脑室，10分钟后，在MCAO前15分钟注射Ro-31-8425（400μg/ kg）; （7）注射5-HD和DZX后，给5-HD + PMA组（n = 15）的大鼠腹膜内注射PMA（200μg/ kg）。

应用案例

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