- ￥260
- 康瑞纳
- 进口/国产
- A2792
- 2025年07月13日
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- 保存条件：
RT/2-8℃/-20℃
- 保质期：
3年
- 英文名：
Puromycin
- 库存：
999
- 供应商：
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号：
58-58-2
- 规格：
25mg
嘌呤霉素 58-58-2 嘌呤霉素 58-58-2
产品名称：嘌呤霉素 58-58-2
产品编号：A2792
中文别称 二盐酸嘌呤霉素；嘌呤霉素盐酸盐
英文别称 Puromycin
CAS 58-58-2
分子式 C22H29N7O5·2HCl
分子量 544.44
储存条件 -20℃
有效期 4年
溶解性 50 mg/mL in water
危险代码 R:22
纯度 PURITY: ≥99%
性状（性状） 白色粉末
包装 支
规格 25mg 100mg
说明：蛋白质合成抑制剂。抑制细菌、藻类原生物和哺乳动物细胞生长。
嘌呤霉素（Puromycin）是由白黑链霉菌（Streptomyces alboniger）发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。作用机制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。
嘌呤霉素产生菌Streptomyces alboniger内发现的pac基因编码嘌呤霉素N-乙酰转移酶（PAC），赋予机体对嘌呤霉素产生抗性。这一特性如今普遍应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。
嘌呤霉素在细胞稳转株筛选中的普遍应用与慢病毒载体的特性有关，现在商业化的慢病毒载体多数都携带pac基因。在某些特定情况下，嘌呤霉素亦可以用来筛选转化携带pac基因质粒的大肠杆菌菌株。
溶解性：溶于水，参考浓度50mg/ml。
使用方法
1.建议使用浓度
哺乳动物细胞：1-10 μg/mL，最佳浓度需要杀灭曲线来确定；
大肠杆菌：LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，使用浓度为125μg/mL。注：使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节，而且受宿主细胞本身的影响。
2.溶解方法
用蒸馏水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液，经0.22 μm滤膜过滤除菌后分装于-20℃冻存；也可溶于甲醇，配制成10 mg/ml的储存液。
3. 嘌呤霉素杀灭曲线的确定（以shRNA转染或者慢病毒转导为例）
嘌呤霉素有效筛选浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢情况及细胞所处细胞周期位置等有关。为了筛选到稳定表达的shRNA细胞株，确定杀死未转染/转导细胞的最低浓度嘌呤霉素至关重要。建议初次做实验的客户一定要建立适合自身实验体系的杀死曲线（kill curve）。
1） Day 1：24孔板内以5~8 x 104 cells/孔的密度铺板，铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。37℃细胞孵育过夜；
2） Day 2：a）准备筛选培养基：含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基（如0-15μg/mL，至少5个梯度）；b）往孵育过夜后的细胞内更换新鲜配制的筛选培养基；之后37℃孵育细胞；
3） Day 4：更换新鲜的筛选培养基，并观察细胞存活率。
4） 根据细胞的生长状态，约2-3天更换新鲜的筛选培养基；
5） 每日监测细胞，观察存活细胞率，从而确定抗生素筛选开始4-6天内有效杀死非转染或者所有非转导细胞的药物最低浓度。
4. 哺乳动物稳定转染细胞株的筛选
等转染含有pac基因的质粒后，细胞在含有嘌呤霉素的培养基中增殖，以筛选出稳定转染子。
1）细胞转染48h后，将细胞（原样或稀释）置于含有适当浓度嘌呤霉素的新鲜培养基中培养。
注意：当细胞处于分裂活跃期时，抗生素作用最明显。细胞过于密集，抗生素产生的效力会明显下降。最好进行细胞分盘使其密度不超过25%。
2）每隔2-3天，移除和更换含有嘌呤霉素的培养基。
3）筛选7天后评估细胞形成的病灶。病灶可能需要额外的一周或者更多时间，这依赖于宿主细胞系和转染筛选效率。注意：每日进行细胞生长状态的观察。嘌呤霉素的筛选至少需要48h，有效浓度嘌呤霉素的筛选周期一般在3-10天。
4）转移和放置5-10个抗性克隆到一个35mm的培养皿中，用选择培养基继续培养7天。此次富集培养是为日后的细胞毒性实验做准备。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）嘌呤霉素为有毒化合物，操作时请小心拿放。
溶解性:DMSO，鉴定方法:液相，熔点:102℃-260℃，沸点：522.2°C at 760 mmHg，密度:1.064 g/cm³，保存条件:-20℃/2-8℃/RT避光，运输条件:2-8℃，保质期:2年，产地:国产/进口，品牌:北京康瑞纳生物，类别:生化试剂，库存:999，用途:用于科研实验，细胞培养，体外诊断，配方原料，医药生产等方面；使用方法: 详询客服
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CD58 分子 CD58 常用单克隆抗体或代号： G26,BRIC5;(LFA- 3) 主要表达细胞： 广泛 [AS] 分子质量(kDa)和结构： gp55- 70,(部分GPI连接)(IgSF) 功 能： 与CD2结合,粘附 CD58 Aka LFA-3 (lymphocyte function associated antigen); ligand for CD2
实验58 交互抑制 【目的要求】 观察拮抗肌活动时的交互抑制现象，并证明这种现象的生理基础是反射中枢活动的协调。 【基本原理】 腓肠肌和胫前肌是一对拮抗肌。冲动传入中枢引起支配一侧后肢的腓肠肌的运动神经元兴奋时，腓肠肌收缩，同时支配胫前肌的运动神经元抑制，胫前肌舒张，后肢屈曲。 【动物与器材】 蟾蜍或蛙、常用手术器械、记纹鼓、电磁标、通用杠杆，刺激
由白黑链霉菌（ Streptomyces alboniger）的培养滤液中获得的抗菌素，除对所有细菌具抗性外，还具有抗肿瘤活性。由于其结构与 tRNA的末端结构类似，故能抑制细菌及真核细胞的蛋白质合成。常作为实验用药。它作用于结合在核糖核蛋白体上相应部位的肽酰 tRNA，可使肽酰嘌呤霉素从核糖核蛋白体上游离出来。
