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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
54
- 英文名:
Active Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
| 产品名称 | 鸡肿瘤坏死因子α(TNFa)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7745 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Chicken (Gallus,鸡) 。 |
英文别名:DIF; TNF-A; TNFSF2; Cachectin; Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily Member 2
物种:Chicken (Gallus,鸡) 。
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:7.9
应用:Cell culture; Activity Assays.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 中胚层诱导早期反应蛋白2抗体 Anti-MIER2 WB IHC-P IHC-F IF | IFNA14重组小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 (His 标签) Protein |
| 巨噬细胞清道夫受体1抗体 Anti-MSR1 WB IHC-P IHC-F IF | 环腺苷二0酸核糖水解酶(cADPRH)重组蛋白 Recombinant Cyclic ADP Ribose Hydrolase (cADPRH) |
| 牛结核杆菌菌体蛋白抗体 Anti-Mycobacterium bovis WB IHC-P IHC-F IF | DCUN1D1重组人 DCUN1D1 / SCCRO 蛋白 (His 标签) Protein |
| T淋巴细胞成熟相关蛋白抗体 Anti-MAL WB IHC-P IHC-F IF | CES2 Protein Human 重组人 CES2 / Carboxylesterase-2 蛋白 (His 标签) |
| 黑色素瘤相关抗原抗体D1抗体 Anti-MAGED1 WB IHC-P IHC-F IF | IL18R1 Protein Canine 重组狗 IL18R1 蛋白 (Fc 标签) |
| 5-羟色胺受体3B抗体 Anti-5HT3B receptor WB IHC-P IHC-F IF | CD63重组大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 5-羟色胺受体3C抗体 Anti-5HT3C WB IHC-P IHC-F IF | H1F0 Protein Human 重组人 H1F0 / Histone H1 蛋白 (His 标签) |
| 长链脂肪酸转运蛋白4抗体 Anti-SLC27A4 WB IHC-P IHC-F IF | FCER2重组人 CD23 / FCER2 蛋白 (His 标签) Protein |
| 肿瘤坏死因子α诱导蛋白9/前列腺六跨膜上皮抗原抗体4抗体 Anti-STEAP4 WB IHC-P IHC-F IF | PPBP Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 标签) |
| 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶31抗体 Anti-STK31 WB IHC-P IHC-F IF | TNFSF13重组小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体 Anti-phospho-c-Abl WB IHC-P IHC-F IF | CCK8 (Cholecystokinin-8 0.5mgCCK8 (Cholecystokinin-8) 胆囊收缩素/缩胆囊素(八肽) |
| 1号染色体开放阅读框58抗体 Anti-C1orf158 WB IHC-P IHC-F IF | IL18R1 Protein Rat 重组大鼠 IL18R1 蛋白 (His 标签) |
| CDC42效应蛋白3抗体 Anti-CDC42EP3 WB IHC-P IHC-F IF | KLK4 Protein Human 重组人 KLK-4 / Kallikrein-4 蛋白 (His 标签) |
| 21号染色体开放阅读框66抗体 Anti-C21orf66 WB IHC-P IHC-F IF | 鸡肿瘤坏死因子α(TNFa)活性蛋白CTRL重组人 CTRL-1 / CTRL / Chymotrypsin-like protease 蛋白 (His 标签) Protein |
| 7号染色体开放阅读框43抗体 Anti-C7orf 43 WB IHC-P IHC-F IF | 癌胚抗原相关细胞粘附分子1(CEACAM1)天然蛋白 Native Carcinoembryonic Antigen Related Cell Adhesion Molecule 1 (CEACAM1) |
天然蛋白质关键参数有哪些?
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验1975年Carswell等发现接种BCG的小鼠注射LPS后,血清中含有一种能杀伤某些肿瘤细胞或使体内肿瘤组织发生出血坏死的因子,称为肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)。1985年Shalaby把巨噬细胞产生的TNF命名为TNF-α,把T淋巴细胞产生的淋巴毒素(1ymphotoxin,LT)命名为TNF-β。TNF—α又称恶质素。 1.TNF的产生 (1)TNF-α是一种单核因子,主要由单核细胞和巨噬细胞产生,LPS是较强的刺激剂。IFN—r、M—CSF
细胞因子简介 细胞因子(Cytokine,CK)是一类能在细胞间传递信息、具有免疫调节和效应功能的天然活性蛋白质,可以有效促进免疫细胞(如DC细胞,CIK细胞等)、干细胞的体外生长。根据细胞因子主要的功能可分为以下几类: 1,白细胞介素(Interleukin,IL)由淋巴细胞、单核细胞或其它非单个核细胞产生的细胞因子,在细胞间相互作用、免疫调节、造血以及炎症过程中起重要调节作用。 2,集落刺激因子(Colonystimulatingfactor,CSF)根据不同细胞因子刺激造血
2和与抗原加工有关的基因称之为低分子量多肽或称大的多功能蛋白酶LMP2(low molecular weight polypeptides or large multifunctional protease-2)、LMP7也位于Ⅱ类基因区。Ⅲ类基因区包括补体C2、C4、B因子,此外,21羟化酶A与B、HSP70(heat shock protein70,热休克蛋白70)和肿瘤坏死因子α、β基因也在这里。21A是假基因,21B具有编码21羟化酶功能。21羟化酶是肾上腺皮质合成皮质醇和醛固醇必不可少的酶
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