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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
41
- 英文名:
Active Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
大鼠粒细胞集落刺激因子(GCSF)真核蛋白
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 人趋化因子C-C-基元配体3样蛋白1(CCL3L1)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7610 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Homo sapiens (Human,人) 。 |
英文别名:CCL3-L1; LD78; SCYA3L; SCYA3L1; MIP1AP; MIP1-Alpha-P; Small Inducible Cytokine A3-Like 1; Macrophage Inflammatory Protein 1-Alpha-P; Tonsillar Lymphocyte LD78 Beta
物种:Homo sapiens (Human,人) 。
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:-
应用:Cell culture; Activity Assays
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 整合素α7抗体 Anti-ITGA7 WB IHC-P IHC-F IF | CD28重组小鼠 CD28 蛋白 (His & Fc 标签) Protein |
| 胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白2抗体 Anti-IGF2BP2 WB IHC-P IHC-F IF | CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP 0.5mgCGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP) 降钙素基因相关肽 |
| 磷酸化整合素β4抗体 Anti-phospho-ITGB4 WB IHC-P IHC-F IF | CMBL重组人 CMBL 蛋白 (His 标签) Protein |
| 胰岛素样生长因子结合蛋白1抗体 Anti-IGFBP1 WB IHC-P IHC-F IF | CCL7 Protein Human 重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 标签) |
| 胰岛素样生长因子结合蛋白4抗体 Anti-IGFBP4/IBP4 WB IHC-P IHC-F IF | MBL1 Protein Mouse 重组小鼠 MBL1 蛋白 (His 标签) |
| 去泛素酶10抗体 Anti-USP10 WB IHC-P IHC-F IF | Coomassie brilliant blue R250 5g |
| 上调基因4抗体 Anti-URG4 WB IHC-P IHC-F IF | 粘蛋白5B(MUC5B)重组蛋白 Recombinant Mucin 5 Subtype B (MUC5B) |
| 尿皮质素UCN3抗体 Anti-Urocortin 3 WB IHC-P IHC-F IF | CDH1重组人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 (His 标签) Protein |
| 泛素融合降解样蛋白1抗体 Anti-UFD1L WB IHC-P IHC-F IF | PVRL2 Protein Human 重组人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 蛋白 (His 标签) |
| 泛素特异性蛋白酶9X抗体 Anti-USP9X WB IHC-P IHC-F IF | HA重组甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein |
| 骨形态发生蛋白受体1B抗体 Anti-BMPR1B WB IHC-P IHC-F IF | ZNF268 (zinc finger protein ZNF268 0.5mgZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1c) 人锌指脂蛋白-1c(抗原) |
| 短蛋白聚糖抗体 Anti-Aggrecan WB IHC-P IHC-F IF | MAPK14 Protein Human 重组人 p38 alpha / MAPK14 蛋白 (His 标签) |
| 巴尔得-别德尔综合征相关蛋白12抗体 Anti-BBS12 WB IHC-P IHC-F IF | IL16 Protein Human 重组人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 (His 标签) |
| BTB/POZ结构域蛋白3抗体 Anti-BTBD3 WB IHC-P IHC-F IF | 人趋化因子C-C-基元配体3样蛋白1(CCL3L1)活性蛋白UCHL3重组人 UCHL3 / UCH-L3 蛋白 (His 标签) Protein |
| 碱性亮氨酸拉链蛋白BZW1抗体 Anti-BZW1 WB IHC-P IHC-F IF | Caspase-8 (pro Mch5 0.5mgCaspase-8 (pro Mch5) 半胱氨酸蛋白酶8抗原 |
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文献和实验人 1-118 44c a. Korf等和Kohl等的研究中包含了六组氨酸标签。 b. 可溶性蛋白量大于等于10%即认为该融合蛋白可溶。 c. 纯化后的融合蛋白如果在SDS-PAGE后考染在合适位置出现条带即认为可溶。 Korf等的还发现对于定位于真核细胞细胞器,质膜或者骨架的蛋白,相对于其它标签系统来讲,NusA标签是最好的可溶性表达
杆菌的包涵体可采用离心收获。 洗涤 包涵体常用的洗涤试剂为中性去垢剂和还原剂。包涵体中主要由重组蛋白组成,同时也含有一些外膜蛋白(Omp C、Omp F、Omp A)、16S 和 23S、5S的r RNA、质粒 DNA 和其它杂质。去除这些杂质,可采用去垢剂 Triton X-100、脱氧胆酸盐和低浓度的变性剂等对包涵体充分洗涤。包涵体洗涤的洁净程度,对于后续的纯化步骤十分重要,包涵体纯度高,可以大大降低后续的纯化压力。但是,变性剂尿素的使用应该注意的是大肠杆菌外膜蛋白Omp T(37 kD
坏死因子(Tumornecrosisfactor,TNF)根据其产生来源和结构不同,可分为TNF-α和TNF-β两类,前者由单核-巨噬细胞产生,后者由活化T细胞产生,又名淋巴毒素。TNF除具有杀伤肿瘤细胞外,还有免疫调节、参与发热和炎症的发生。 5,转化生长因子-β家族(Transforminggrowthfactor-βfamily,TGF-βfamily)主要包括TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGFβ1β2以及骨形成蛋白(BMP)等。 6.趋化因子家族(Chemokinefamily)包括两个亚族:(1)C-X-C
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