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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
Active Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
大鼠粒细胞集落刺激因子(GCSF)真核蛋白
| 产品名称 | 小鼠碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7643 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Mus musculus (Mouse,小鼠) 。 |
英文别名:B-FGF; BFGF; FGFB; HBGH-2; Basic Fibroblast Growth Factor; Heparin-binding growth factor 2
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠) 。
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:9.7
应用:Cell culture; Activity Assays
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 白细胞介素-10抗体 Anti-IL-10 WB IHC-P IHC-F IF | CDH15重组大鼠 Cadherin-15 / CDH15 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| IQCC蛋白抗体 Anti-IQCC WB IHC-P IHC-F IF | GLUT3(Glucose transporter 3 0.5mgGLUT3(Glucose transporter 3) 糖转运蛋白3抗原 |
| IQCA1蛋白抗体 Anti-IQCA1 WB IHC-P IHC-F IF | RHOA重组人 RhoA 蛋白 (His 标签) Protein |
| 集成复杂蛋白亚单位3抗体 Anti-INTS3 WB IHC-P IHC-F IF | CD247 Protein Human 重组人 CD247 / CD3-ZETA 蛋白 (GST 标签) |
| 干扰素alpha 14蛋白抗体 Anti-IFNA14 WB IHC-P IHC-F IF | CCL8 Protein Mouse 重组小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 标签) |
| 磷酸化血管扩张刺激磷蛋白抗体 Anti-Phospho-VASP WB IHC-P IHC-F IF | CLEC5A重组食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 蛋白 (His 标签) Protein |
| 囊泡相关膜蛋白2抗体 Anti-VAMP2 WB IHC-P IHC-F IF | TBCB Protein Human 重组人 TBCB 蛋白 (His 标签) |
| 氨基转运蛋白VGAT抗体 Anti-VGAT WB IHC-P IHC-F IF | CD164重组人 CD164 / Endolyn 蛋白 (His 标签) Protein |
| 氢离子转运ATP合成酶A1抗体 Anti-V-ATPase A1 WB IHC-P IHC-F IF | NT5E Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白 (His 标签) |
| 血管扩张刺激磷蛋白抗体 Anti-VASP WB IHC-P IHC-F IF | WIF1重组小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 (His 标签) Protein |
| Apollon凋亡抑制蛋白抗体 Anti-BIRC6 WB IHC-P IHC-F IF | IL-4(Interleukin-4 0.5mgIL-4(Interleukin-4)human peptide 白介素4抗原 |
| 氨肽酶A抗体 Anti-BP1 WB IHC-P IHC-F IF | CPB2 Protein Mouse 重组小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白 (His 标签) |
| 骨涎蛋白抗体 Anti-Bone sialoprotein WB IHC-P IHC-F IF | IL2 Protein Human 重组人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 |
| Bcl2 beta蛋白抗体 Anti-Bcl-2 beta WB IHC-P IHC-F IF | 小鼠碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)活性蛋白BTK重组人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 标签) Protein |
| 细胞死亡调解子抗体 Anti-Bim WB IHC-P IHC-F IF | ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腺皮质激素(18-39)(抗原) |
天然蛋白质关键参数有哪些?
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验细胞因子简介 细胞因子(Cytokine,CK)是一类能在细胞间传递信息、具有免疫调节和效应功能的天然活性蛋白质,可以有效促进免疫细胞(如DC细胞,CIK细胞等)、干细胞的体外生长。根据细胞因子主要的功能可分为以下几类: 1,白细胞介素(Interleukin,IL)由淋巴细胞、单核细胞或其它非单个核细胞产生的细胞因子,在细胞间相互作用、免疫调节、造血以及炎症过程中起重要调节作用。 2,集落刺激因子(Colonystimulatingfactor,CSF)根据不同细胞因子刺激造血
哺乳动物细胞是表达具有天然活性蛋白的最佳宿主其优势在于能正确有效地识别真核蛋白的合成、加工和分泌信号,识别和去除基因中的内含子,再经剪切加工成为成熟的mRNA,能准确地完成糖基化、磷酸化,形成链内和链间二硫键及蛋白水解等翻译后加工过程,因而产生的完整抗体和天然抗体一样,具有生物学活性,既可识别抗原又可激活补体系统。哺乳动物细胞易被重组的DNA转染,经过筛选可得到转化的细胞,具有遗传稳定性和可重复性.表达的产物
元的基因表达调控的单元,共同开启或关闭,转录出多顺反子(polycistron)的mRNA;真核生物则是一个结构基因转录生成一条mRNA,即mRNA是单顺反子(monocistron),基本上没有操纵元的结构,而真核细胞的许多活性蛋白是由相同和不同的多肽形成的亚基构成的,这就涉及到多个基因协调表达的问题,真核生物基因协调表达要比原核生物复杂得多。(5)原核基因组的大部分序列都为基因编码,而核酸杂交等实验表明:哺乳类基因组中仅约10%的序列为蛋白质、rRNA、tRNA等编码,其余约90%的序列功能
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