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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2℃-8℃
- 保质期:
2 4个月
- 英文名:
Cell Total Protein Lysate for Western Blotting & Immunoprecipitation, Without Inhibitor
- 库存:
1000
- 供应商:
赛尔沃德生命科学部
- 规格:
100ml
多种成分均可以从细胞中提取总蛋白,如 Triton、SDS、NP-40 等,Western 及 IP细胞裂解液是采用一种非变性裂解方法来裂解细胞,并获得总蛋白的裂解液。所获得的蛋白质可以用于 PAGE 电泳,Western,免疫沉淀和免疫共沉淀等,主要由 Tris-HCl、NaCl、低浓度 Triton X-100,低浓度 sodium pyrophosphate等组成,不含蛋白酶、磷酸酶抑制剂,并维持原有的蛋白间相互作用。
用Western及IP细胞裂解液(无抑制剂)得到的蛋白,可以用 BCA 蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100 等干扰物质,不宜用 Bradford 法测定由 Western 及 IP 细胞裂解液获得样本的蛋白浓度。
规格: 100ml
有效期: 12个月
储存条件:2-8℃
运输条件:低温运输
定制服务:
本公司可以提供定制培养基服务,可以按照客户需求定制不同组分培养基,常规培养基所含组分浓度可以任意调节,可增加可去除,数量无限制。
购买说明:
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文献和实验into eppyincubate 45' 4℃ à Vortex several times duringspin 10 secs 4℃divide sample: ~400 l for IP/ ~ 100 l for WesternIP -- 1° Ab => 4℃ 1 hour rockingif 1° is not rab.à 2° Ab => 4℃ 1 hour rocking (RaM 2l)-- PrA/Seph 4℃ 1 hour rocking 40l-- Spin down 4℃ 1'-- Wash 3X
或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
PHIs 诱导心肌细胞中的钙释放。 PHD2 在心肌细胞中激活肌浆网通道辅助蛋白 CaMKⅡ。用 shRNA 干扰技术敲低心肌细胞中 PHD2,Western blot 证实了 PHD2 的沉默。与对照细胞相比,沉默 PHD2 显著增加了 CaMKⅡ的磷酸化。 Ca2+在心肌细胞中介导 PHI 刺激引起的 AMPK 激活。肌浆网通道抑制剂瑞安诺丁显著降低了 PHI 处理诱导的与 Ca2+相关的荧光强度。慢病毒介导的 RyR2 特异性 shRNA 显著降低了 RyR2 在 mRNA 水平上的表达
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