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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
- 英文名:
HRP Oligo Conjugation Kit (Single Label with Thiol Oligo)
- 保质期:
1年
- 保存条件:
2-8 °C/-20 °C
- 规格:
1 kit
产品介绍:
该 HRP-Oligo 偶联试剂盒可与受保护的硫醇修饰寡核苷酸(二硫化物形式)配合使用。客户提供含有 3' C6 二硫键或 5' C6 二硫键的硫醇修饰寡核苷酸,这些寡核苷酸可从许多商业寡核苷酸供应商处轻松获得。使用试剂盒组件,客户可以还原寡核苷酸的二硫键,然后使硫醇寡核苷酸与活化的 HRP 反应生成 HRP-寡核苷酸偶联物。Q 柱纯化步骤通常会提供纯度大于 85% 的 HRP-oligo。
该试剂盒提供标记一个 (CM53402x1) 至三个寡核苷酸样品 (CM53402x3) 的材料。反应规模:5 nmole oligo。
硫醇寡核苷酸的要求:
- 量:5 nmol
- oligo 用 3' C6 二硫键或 5' C6 二硫键修饰
- 优选地,二硫化物-寡聚物应经过 HPLC 纯化和冻干
该 HRP-Oligo 偶联试剂盒的主要特点:
- 用于偶联的高质量马来酰亚胺活化 HRP:>99% 纯度和 >200 单位/mg 蛋白质活性
- 单标签寡核苷酸每个 HRP 的最佳马来酰亚胺基团:典型批次为 1.2
- 单一纯化步骤可提供 85~90% 的单一标记 HRP-oligo 偶联物
- 快速准备:不到 1 小时的动手时间
- 轻松净化:不到30分钟
- 偶联和纯化后 HRP 没有活性损失
-
包含所有试剂,从制备到纯化
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文献和实验-iTTM RNAi技术允许你利用RNAi的威力――利用各种各样的技术――进行基因阻断的研究。内源RNAi机制RNAi在真核细胞中的发生过程是通过一个被称之为Dicer的酶,将长的dsRNA裂解成21-23核苷酸的短的干扰RNA(siRNA)。siRNA变成细胞内RNA诱导沉默复合体(RNA-induced silencing complex RISC)的一部分,该复合物通过互补靶定将要降解的细胞内的mRNA,最终将细胞中的基因表达阻断。BLOCK-iT™ RNAi技术提供了以下种在细胞中产生siRNA
,然后对反应进行纯化,去除所有酶和反应成分,洗脱留下的RNA样本(图4)。 图 4 | 使用特定探针进行 RNase H 介导的 rRNA 消耗。 基于RNase H的降解被广泛使用,因为反应组分和寡核苷酸价格便宜,而且它们的探针数量可以增加以覆盖许多物种。然而,该方法基于降解的性质带来了非特异性去除珍贵转录本的风险,也使其不适用于某些应用。例如,依赖于在耗尽之前添加 DNA 接头的 RNA-Seq 工作流程不应进行RNase H / DNase I 处理,因为这也会降解 RNA-DNA 融合分子
-11–dUTP加于其3’-OH端(脱去一个焦磷酸)。 4.酶标DNA 标记试剂是辣根过氧化酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)。通过对苯醌(PBQ)与聚乙烯亚胺(PEI)连接而成(HRP-PBQ-PEI ),此试剂在戊二醛的作用下与变性的DNA结合,使HRP与DNA连接在一起,组成HRP标记的DNA探针。 5.酶标寡核苷酸 包括核苷酸5’末端标记HRP法和内部标记AP法。前者是在HRP中产生一个-HS反应基团,在寡核苷酸合成终了加在5’端,带一个C6的-HS基
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