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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
29
- 英文名:
Recombinant Growth Differentiation Factor 3 (GDF3)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 大鼠生长分化因子3(GDF3)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D6944 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) |
英文别名:Vgr2; Vg-Related Gene 2
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:分泌
预测分子量:14.5kDa
实际分子量:15/18kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Ala253~Gly366 (Accession # A2SY89) with N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:7.2
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 细胞基质金属蛋白酶(MMP-2)生物素明胶法比色定量检测试剂盒20次 | EFNA2重组小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 Protein |
| RatN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit大鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒规格:96T/48T | FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 标签), Biotinylated |
| 大鼠己糖激酶(HK)ELISA试剂盒 ,英文名: HK ELISA Kit | IDO1重组人 IDO1 / IDO 蛋白 Protein |
| Guinea pig ierleukin 12 (IL-12/P70) ELISA Kit 豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒 | TNFSF9 Protein Rat 重组大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (Fc 标签) |
| 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T | ADH/AVP peptide 抗利尿激素/血管升压素抗原(和肽素 1mgADH/AVP peptide 抗利尿激素/血管升压素抗原(和肽素) |
| 兔肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (EGF Domain, Fc 标签) |
| Human thromboxane A2 (TX-A2) ELISA Kit 人血栓素A2(TX-A2)ELISA试剂盒 | RET重组人 RET Kinase 蛋白 (His 标签) Protein |
| HumanC4bindingprotein,C4BPELISAKit 人C4结合蛋白(C4BP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | VEGFA Protein Mouse 重组小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白 |
| HumanFibronectin,FNELISA试剂盒人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒规格:96T/48T | TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor 0.5mgTSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(CT) 促甲状腺素受体(抗原) |
| 组织氨含量光谱法定量检测试剂盒20次 | 半干法转膜液(粉剂) 1*1L |
| HumanEndomeiumAibody,EMAbELISAKit人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T | MSR1重组大鼠 MSR1 / SCARA1 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 牛腺病毒(ADV)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | EV71(Human enterovirus 71 0.5mgEV71(Human enterovirus 71)VP1(CT) 肠道病毒71型/手足口病病毒抗原(C端) |
| 糜蛋白酶(Chymase)ELISA试剂盒 ,英文名: Chymase ELISA Kit | CDH6 Protein Human 重组人 Cadherin-6 / CDH6 蛋白 (His 标签) |
| 人组织蛋白酶G自身抗体(Cath G Ab)免疫试剂盒 Human Cathepsin G Aibody,Cath G Ab ELISA Kit | 大鼠生长分化因子3(GDF3)重组蛋白PDGFRA重组人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His 标签) Protein |
| RatAi-glucoprotein210,GP210ELISA试剂盒大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒规格:96T/48T | 组织型纤溶酶原激活因子(tPA)重组蛋白 Recombinant Plasminogen Activator, Tissue (tPA) |
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文献和实验Medium培养基产品的应用 ◆贴壁哺乳动物细胞和悬浮哺乳动物细胞的培养 ◆疫苗生产中病毒颗粒的制备 ◆支持杂交瘤形成时的细胞融合 ◆支持单核细胞、巨噬细胞、上皮细胞和成纤维细胞系的细胞生长 适应的细胞类型 Cell lines and Cell types ● 235-1,MNQ Rat Pituitary 大鼠垂体脑细胞 ● B82 Mouse L cells –connective tissue 小鼠L细胞联结组织
哺乳动物细胞和悬浮哺乳动物细胞的培养 ◆疫苗生产中病毒颗粒的制备 ◆支持杂交瘤形成时的细胞融合 ◆支持单核细胞、巨噬细胞、上皮细胞和成纤维细胞系的细胞生长 适应的细胞类型 Cell lines and Cell types ● 235-1,MNQ Rat Pituitary 大鼠垂体脑细胞 ● B82 Mouse L cells –connective tissue 小鼠L细胞联结组织 ● COS1, COS
酵母表达系统成功地应用到了疟原虫疫苗和血吸虫疫苗(Sm28GST)的研究中。研究人员利用Sm28GST重组蛋白免疫大鼠、小鼠和狒狒均能在动物体内诱导出保护性免疫反应,现正在进一步试验中。第二军医大学病原生物学教研室已经成功地使MSP1在毕赤酵母中表达。MSP1是当今疟疾疫苗主要的候选抗原。研究证实表达产物能与识别MSP1分子二硫键依赖构象表位的特异性单抗发生很强的反 应,表明MSP1重组蛋白至少在该表位构象上与天然蛋白一致,从毕赤酵母中分离得到大量 MSP1为开展该蛋白的结构与功能,特别是测定其疟疾保护性免疫
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