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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
25
- 英文名:
Recombinant Interleukin 4 (IL4)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
| 产品名称 | 山羊白介素4(IL4)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D6572 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Capra hircus; Caprine (Goat,山羊) |
英文别名:BSF1; BCGF1 ;B Cell Stimulatory Factor 1; Lymphocyte stimulatory factor 1; B Cell Growth Factor; Binetrakin; Pitrakinra
物种:Capra hircus; Caprine (Goat,山羊)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:n/a
预测分子量:-
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:-
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
:
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| Humanplacealribonucleaseinhibitor,HPRIELISAKit人胎盘核糖核酸抑止剂(HPRI)ELISA试剂盒规格:96T/48T | CDH13重组大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 大鼠0酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3)ELISA试剂盒 ,英文名: pGSK-3 ELISA Kit | FGFR1 Protein Human 重组人 FGFR1 / CD331 蛋白 (His & GST 标签) |
| 人C反应蛋白(CRP)ELISA检测试剂盒HumanC-ReactiveProtein,CRPELISAKit 96T/48T | SERPINB6重组人 SerpinB6 / PI-6 蛋白 (His 标签) Protein |
| 鲨鱼孕激素/孕(PROG)免疫试剂盒 Shark Progesterone ,PROG ELISA kit | AXL Protein Mouse 重组小鼠 Axl Kinase 蛋白 (His 标签) |
| CLIAKitforOX-B(HumanOrexinB)ELISAKit人食欲素/阿立新B规格:48T/96T | Cyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61 0.5mgCyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61) 富半胱氨酸肝素结合蛋白61抗原 |
| Rat plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒 | FAM45A Protein Human 重组人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白 |
| HumanIsoprenalineHydrochloride,iso-HydELISAKit 人异(iso-Hyd)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | SHPK重组人 CARKL / SHPK 蛋白 Protein |
| HumanCoisolELISA试剂盒人皮质醇(Coisol)ELISA试剂盒规格:96T/48T | FCGR2B Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 标签), Biotinylated |
| 组织C-KIT激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次 | IL1R1重组小鼠 IL1R1 / CD121a 蛋白 (His 标签) Protein |
| HumanproteinkinaseB,PKBELISAKit人蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒规格:96T/48T | DPP4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白 (Fc 标签) |
| 人β羟(β-OHB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | SMAD2重组小鼠 Smad2 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| 兔子骨涎蛋白(BSP)免疫试剂盒 Rabbit bone sialoprotein,BSP ELISA Kit | 干扰素α2(IFNα2)重组蛋白 Recombinant Interferon Alpha 2 (IFNa2) |
| Porcinemaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISA试剂盒猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒规格:96T/48T | SGK3 Protein Human 重组人 SGK3 / SGKL 蛋白 (His & GST 标签) |
| 沙眼衣原体(CT)ELISA试剂盒 ,英文名: CT ELISA Kit | 山羊白介素4(IL4)重组蛋白GATA结合蛋白4(GATA4)重组蛋白 Recombinant GATA Binding Protein 4 (GATA4) |
| HumanAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AmAC-1ELISA试剂盒人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T | CLEC6A重组人 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 (Fc 标签) Protein |
天然蛋白质关键参数有哪些?
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验。 细菌来源细胞因子 上世纪70年代出现的基因工程重组技术,使得使用原核细菌宿主,如大肠杆菌进行天然蛋白的重组表达和生产风靡一时,因其速度快、生产成本低、产率高等优点,广泛用于包括细胞因子在内的多种重组蛋白表达的科研和生物制药领域。但随之而来,使用低等细菌进行蛋白表达的技术弊端也日益显现:低等原核细菌宿主表达的细胞因子,其结构和天然细胞因子蛋白有较大的差异。由于缺乏高等动物细胞中特有的各种细胞器,细菌表达的蛋白肽链无法完成翻译后修饰,缺乏必要的糖基化和磷酸化,二硫键配对完全随机;细菌
第1节- 试剂1.1涂层缓冲液PBS(137 mM氯化钠,2.7 mM的氯化钾,8.1 mM的磷酸氢二钠,1.5 mM磷酸二氢钾)1.2封闭液5%脱脂乳于PBST中(0.05%Tween-20)1.3稀释剂2%脱脂乳于PBST中(0.05%Tween-20)1.4柠檬酸缓冲液3.65克柠檬酸,4.76克磷酸氢二钠,溶解于500毫升双蒸水1.5兔抗GST抗体兔抗GST抗体1.6 HRP结合山羊抗兔IgG(H + L)山羊抗兔IgG(H + L),結合过氧化物酶第2节- 分析方法注:以下方法是一个
随着生命科学的发展,围绕蛋白进行的研究越来越多,抗体试剂在实验中的重要性越来越举足轻重。面临着纷呈复杂的抗体试剂市场,如何选择到适合自己实验的抗体就变得尤为重要。 一、关于特异性的选择: 特异性的选择主要需要考虑四个方面:蛋白特异性、种属特异性、实验方法特异性、标记物的特异性。 1、蛋白特异性: 针对需要检测的蛋白查找抗体,几个细节要区分,重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测,对抗体的要求是不一样的,注意查看抗体说明书的检测说明。如果重组蛋白不是全长表达,则需要注意抗体
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