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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
30
- 英文名:
Recombinant Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 大鼠成纤维细胞生长因子9(FGF9)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D6413 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) |
英文别名:GAF; HBFG9; Glia-Activating Factor; Heparin-Binding Growth Factor 9
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:n/a
预测分子量:-
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:-
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
:
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| MouseFolicacid,FAELISAKit小鼠叶酸(FA)ELISA试剂盒规格:96T/48T | TNFRSF11A重组大鼠 TNFRSF11A 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| Ratβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISA试剂盒大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒规格:96T/48T | NT5C3A Protein Human 重组人 NT5C3 蛋白 |
| humanmajorvaultprotein,MVPELISA试剂盒人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA试剂盒规格:96T/48T | DMP1重组人 DMP1 蛋白 (His 标签) Protein |
| humanperoxisomeproliferativeactivatedreceptorgamacoactivator1alpha,PPARGC1ELISAKit人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)ELISA试剂盒规格:96T/48T | REG3D Protein Mouse 重组小鼠 REG3D 蛋白 (His 标签) |
| 大鼠内源性糖皮质激素(GC)ELISA试剂盒 ,英文名: GC ELISA Kit | Gax(growth arrest-specific homeobox 0.5mgGax(growth arrest-specific homeobox) 生长终止特异性同源盒基因抗原 |
| 冰冻切片软骨组织染色试剂盒50次 | HA Protein Influenza B 重组乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) |
| RatAquaporin5,AQP-5ELISA试剂盒大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒规格:96T/48T | 信号素3A(SEMA3A)重组蛋白 Recombinant Semaphorin 3A (SEMA3A) |
| 小鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | TNF重组人 TNF-alpha / TNFA 蛋白 Protein |
| Rat iercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1/CD54) ELISA Kit 大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒 | CTSB重组人 Cathepsin B / CTSB 蛋白 (His 标签) Protein |
| HumanangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISAKit 人血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Japanese white-eye/Hong Kong/1038/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) |
| MouseVitaminB6,VB6ELISA试剂盒小鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒规格:96T/48T | LY6D重组人 LY-6D / LY6D 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| FishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA试剂盒鱼骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒规格:96T/48T | IL1RAP Protein Human 重组人 IL-1RAcP / IL-1R3 蛋白 (His 标签) |
| 人型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | PVRL1 Protein Human 重组人 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 标签) |
| HumanankyrinB,Ank-BELISAKit人锚蛋白B(Ank-B)ELISA试剂盒规格:96T/48T | 大鼠成纤维细胞生长因子9(FGF9)重组蛋白内皮细胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)重组蛋白 Recombinant TEK Tyrosine Kinase, Endothelial (Tie2) |
| 豚鼠白介素4(IL-4)免疫试剂盒 Guinea pig ierleukin 4,IL-4 ELISA Kit | PRELP重组人 PRELP 蛋白 (Fc 标签) Protein |
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文献和实验去除方法是基于白蛋白和 Cibachron 蓝色染料的结合。AlbuminOUT™被优化从样本中去除人的白蛋白。AlbuminOUT™使用快速离心柱方法,每个柱子含有 0.2 ml 的染料结合树脂,从而可以结合大于 2 mg 的人白蛋白。AlbuminOUT™可以从 5-50 微升人血浆中去除大于 98% 的白蛋白。 离心柱形式可以在 10 分钟内去除白蛋白。高结合力的蓝色染料结合树脂可以从人,猪,羊,狗,兔,大鼠和牛样本中达到瞬间的结合和去除白蛋白。AlbuminOUT™或许
的生长因子(PDGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长因子-I(IGF-1)、IGF-II、白血病抑制因子(LIF)、神经生长因子(NGF)、抑瘤素M(OSM)、血小板衍生的内皮细胞生长因子(PDECGF)、转化生长因子-α(TGF-α)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)等。 重组细胞因子是利用基因工程技术在一定的宿主细胞中表达并经过一系列分离纯化工艺制备而成的细胞因子产品,目前已经广泛用于细胞治疗等相关研究领域和医药领域,如肿瘤、感染和造血障碍等疾病的治疗
还有一个优点,该细胞属于成纤维细胞(fibroblast),是一种非分泌型细胞,它本身很少分泌CHO内源蛋白,因此对目标蛋白分离纯化工作十分有利。2、CHO细胞血清培养 传统上CHO细胞的培养都是在DMEM/F12基础培养基中添加5~10的小牛血清(用于重组蛋白)或胎牛血清(用于杂交瘤生产)单抗来完成的,血清除了供给细胞的营养成分外,还能促进细胞开始合成DNA,对细胞的增殖有很大的作用。实验证明,血清在细胞的体外培养中提供了细胞增殖所必需的生长因子。但哺乳动物的血清价格昂贵,成本高不适于今天的大规
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