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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
21
- 英文名:
Recombinant Interleukin 4 (IL4)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 猪白介素4(IL4)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D6568 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Sus scrofa; Porcine (Pig,猪) |
英文别名:BSF1; BCGF1 ;B Cell Stimulatory Factor 1; Lymphocyte stimulatory factor 1; B Cell Growth Factor; Binetrakin; Pitrakinra
物种:Sus scrofa; Porcine (Pig,猪)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:分泌
预测分子量:16.2kDa
实际分子量:17kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:His25~Cys133 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:9.3
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
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重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 通用型南芥菜花叶病毒(ArabisMosaicVirus;ArMV)试剂盒20次 | CSF1R重组大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His 标签) Protein |
| Humanmelanocyteaibody,MCAbELISA试剂盒人黑色素细胞抗体(MCAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T | FAM3B Protein Human 重组人 FAM3B 蛋白 (Fc 标签) |
| Humanplacealprotein,PPELISAKit人胎盘蛋白(PP)ELISA试剂盒规格:96T/48T | FABP3重组人 FABP3 / H-FABP / M-FABP 蛋白 Protein |
| 大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒 ,英文名: AMPK ELISA Kit | BMPR1A Protein Mouse 重组小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白 (His 标签) |
| 人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA检测试剂盒HumanPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 96T/48T | DAPK1(Death associated protein kinase 1 0.5mgDAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相关蛋白激酶1抗原 |
| Ratcardiacisoformofopni,cELISA试剂盒大鼠心肌特异性肌钙蛋白T(c)ELISA试剂盒规格:96T/48T | CFHR1 Protein Human 重组人 CFHR1 蛋白 (His 标签) |
| 小鼠17-类固醇(17-KS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | YES1重组人 c-Yes / YES1 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| Human gasin (Gasin) ELISA Kit 人胃泌素(Gasin)ELISA试剂盒 | IFNAR1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (Fc 标签) |
| Humanandrogeeceptor,ARELISAKit 人雄激素受体(AR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | DPEP2重组人 DPEP2 / MBD-2 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| Humancoicoopin-releasingfactor,CRF人促腺皮质激素释放因子(CRF)ELISA试剂盒规格:96T/48T | HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) |
| Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3ELISA试剂盒人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒规格:96T/48T | SMPD1重组小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 (His 标签) Protein |
| HumanAprotinin,APELISAKit人抑肽酶(AP)ELISA试剂盒规格:96T/48T | 白介素1α(IL1α)重组蛋白 Recombinant Interleukin 1 Alpha (IL1a) |
| 兔子核因子κB(NF-κB)免疫试剂盒 Rabbit Nuclear factor-kappa B,NF-κB Elisa Kit | SFRP4 Protein Human 重组人 sFRP4 蛋白 (His 标签) |
| 人β神经生长因子(β-NGF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | 猪白介素4(IL4)重组蛋白SYVN1(synovial apoptosis inhibitor 1 0.5mgSYVN1(synovial apoptosis inhibitor 1) 滑膜细胞凋亡抑制物1(抗体) |
| 沙眼衣原体抗原(CT)ELISA试剂盒 ,英文名: CT ELISA Kit | CTSV重组人 Cathepsin V / Cathepsin L2 / Preproprotein 蛋白 (His 标签) Protein |
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文献和实验重组蛋白A在免疫试剂应用中的新进展广州精达公司-美国免疫学博士 胡勇摘要 抗体是免疫诊断试剂领域最重要的原料,蛋白A是纯化抗体最有效的工具,广泛用于免疫诊断试剂的许多领域。重组蛋白A具有产量大,成本低,纯度高,特异性好的优点。重组蛋白A的国产化将极大促进免疫诊断试剂的产品开发和市场效益。 关键词 抗体纯化 免疫诊断试剂 重组蛋白A 国产化蛋白A(Protein A)为金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白,具有与人类和哺乳动物血液中免疫球蛋白IgG分子的Fc段特异性结合
。 细菌来源细胞因子 上世纪70年代出现的基因工程重组技术,使得使用原核细菌宿主,如大肠杆菌进行天然蛋白的重组表达和生产风靡一时,因其速度快、生产成本低、产率高等优点,广泛用于包括细胞因子在内的多种重组蛋白表达的科研和生物制药领域。但随之而来,使用低等细菌进行蛋白表达的技术弊端也日益显现:低等原核细菌宿主表达的细胞因子,其结构和天然细胞因子蛋白有较大的差异。由于缺乏高等动物细胞中特有的各种细胞器,细菌表达的蛋白肽链无法完成翻译后修饰,缺乏必要的糖基化和磷酸化,二硫键配对完全随机;细菌
去除方法是基于白蛋白和 Cibachron 蓝色染料的结合。AlbuminOUT™被优化从样本中去除人的白蛋白。AlbuminOUT™使用快速离心柱方法,每个柱子含有 0.2 ml 的染料结合树脂,从而可以结合大于 2 mg 的人白蛋白。AlbuminOUT™可以从 5-50 微升人血浆中去除大于 98% 的白蛋白。 离心柱形式可以在 10 分钟内去除白蛋白。高结合力的蓝色染料结合树脂可以从人,猪,羊,狗,兔,大鼠和牛样本中达到瞬间的结合和去除白蛋白。AlbuminOUT™或许
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