BeyoMag™磁珠法血液基因组DNA抽提试剂盒

碧云天生产的BeyoMag™磁珠法血液基因组DNA抽提试剂盒(BeyoMag™ Blood Genomic DNA Isolation Kit with Magnetic Beads)是一种基于新型的硅羟基包被的磁珠作为固相介质，用于安全、便捷、稳定、高效、高质量地分离纯化动物血液基因组DNA的试剂盒。

本试剂盒抽提后获得的基因组DNA可以用于基因组DNA的PCR扩增(PCR amplification of genomic DNA)、酶切(Restriction enzyme digestion)、基因分型(Genotyping)、Southern杂交(Southern blot)、高通量测序(High-throughput sequencing, HTS)、基因组DNA文库的构建(Genomic library construction)等各种常规的基因组DNA分析和实验检测。

本试剂盒的原理和主要操作流程如图1所示。血液样品在裂解液和蛋白酶K的作用下迅速裂解，释放出来的基因组DNA在特定条件下与硅羟基包被的磁珠特异性结合[1]，然后在外界磁场(如磁分离架)的作用下，磁珠与溶液可以快速而高效地分离，再经两次洗涤充分去除非特异性结合的蛋白、盐等杂质，最后用洗脱液将基因组DNA从磁珠上洗脱下来，即可获得高质量的基因组DNA。

图1.BeyoMag™磁珠法血液基因组DNA抽提盒(D0091)的基因组DNA抽提原理图。

本试剂盒抽提效果稳定、得率高、纯度好。本试剂盒的基因组DNA抽提体系经过反复优化，稳定性强，得率高，纯度好。100µl人全血中抽提得到约4.5µg基因组DNA，100µl兔全血中抽提得到约5.6µg基因组DNA，且纯度好，A260/A280通常为1.7-1.9。本试剂盒能从低至25µl的哺乳动物全血样品、5µl的有核红细胞抗凝血样品中抽提得到高质量的基因组DNA。本试剂盒与T公司同类产品的抽提效果对比参见图2。

图2.BeyoMag™磁珠法血液基因组DNA抽提试剂盒(D0091)与T公司同类产品的基因组DNA抽提效果对比图。样品为新鲜100μl兔全血，洗脱液用量为50μl。均取8μl洗脱的样品经混合2μl BeyoRed DNA上样缓冲液(6X) (D0072)，在0.8%琼脂糖凝胶中电泳约30分钟后拍照。实际抽提效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，本图仅供参考。

本试剂盒使用便捷。本试剂盒采用磁珠纯化，整个抽提过程最快约需50分钟。一方面，本试剂盒优化了裂解液成分，仅10分钟就能完成裂解步骤；另一方面，优化了抽提体系，裂解完成后抽提的时间约为35分钟。相比于传统的离心柱式抽提法，本试剂盒的操作流程显著简化，缩短了抽提时间。和国外同类磁珠纯化产品相比，所需操作步骤和操作时间基本一致[2]。

本试剂盒使用安全。本试剂盒通过特殊的磁珠纯化介质进行DNA分离纯化，无须使用酚、氯仿等有毒有害有机试剂。

本产品推荐使用抗凝血液作为样品。对于含无核红细胞的抗凝血液样品(如人全血、小鼠全血等)，建议用量为100-200µl；对于含有核红细胞的抗凝血液样品(如水产类、鸟类、禽类等)，建议用量为5-15µl。本试剂盒也适用于培养动物细胞的基因组DNA提取，建议细胞量为100-200万个。

本试剂盒的小包装、中包装和大包装分别可用于50个、200个和1000个血液基因组DNA样品的提取。

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
D0091S-1	BeyoMag™磁珠	1ml
D0091S-2	裂解液	10ml
D0091S-3	洗涤液	30ml
D0091S-4	洗脱液	5ml
D0091S-5	蛋白酶K	1ml
—	说明书	1份

 

产品编号	产品名称	包装
D0091M-1	BeyoMag™磁珠	4ml
D0091M-2	裂解液	40ml
D0091M-3	洗涤液	120ml
D0091M-4	洗脱液	20ml
D0091M-5	蛋白酶K	4ml
—	说明书	1份

 

产品编号	产品名称	包装
D0091L-1	BeyoMag™磁珠	16ml
D0091L-2	裂解液	160ml
D0091L-3	洗涤液	480ml
D0091L-4	洗脱液	80ml
D0091L-5	蛋白酶K	16ml
—	说明书	1份

保存条件：

蛋白酶K -20ºC保存，其余室温保存，一年有效。其中BeyoMag™磁珠长期不使用时，可以4ºC保存，4ºC可以保存更长时间。蛋白酶K室温(15-25ºC)存放一周，活力无明显下降。

注意事项：

需自备磁分离装置，推荐使用碧云天的1.5/2ml磁分离架(FMS004/FMS008/FMS012/FMS016/FMS024)。

需自备异丙醇和无水乙醇。

由于血液样品的种属、类别及抗凝剂的特殊性，基因组DNA的A260/A230比值可能会较低，但不影响后续PCR扩增、酶切、基因分型等应用。

磁珠在静置后会发生沉降，使用前一定要适当涡旋震荡或颠倒数次至充分混匀。

磁分离前应适度震荡离心管使磁珠充分分散后再靠近磁场。如果出现磁珠挂壁现象，可以在磁珠聚集后晃动管内液体，使挂壁的磁珠流下。

请使用推荐的样品量。如果样品量过大，可能造成磁珠聚集，会影响洗涤进而影响抽提获得的DNA纯度。发生磁珠聚集时，洗涤时需尽量分散磁珠，这样可有效改善抽提效果。如果发生磁珠聚集现象，建议在后续实验中适当减少样品用量。

本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。

本试剂盒需使用56ºC水浴，请提前作好准备。50-56ºC水浴均可以使用。

除特别说明外，本产品说明书中每次Vortex应控制在5-10秒左右。

如需制备不含RNA的高纯度总DNA，需自备DNase free的RNase A，推荐订购碧云天的RNase A (ST576/ST577)。

洗涤液中含有一定浓度的醇类，使用后须旋紧瓶盖以防挥发，并须按照易燃试剂的相关规范进行存放和使用。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。