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常温
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20mg
货号:ALD1980
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文献和实验内的,而酶只有在甘油浓度 具体操作如下:在 1.5 mL 离心管中依次加入DNA(1 μg/μl)20 μg10× 酶切 buffer 4.0 μl限制性内切酶(10 U/μl)5.0 μl加 ddH2O 至 500 μl在最适温度下消化 1-3 hr。消化结束时可取 5 μl 电泳检测消化效果。如果消化效果不好,可以延长消化时间,但超过 6 hr 已没有必要。或者放大反应体积,或者补充酶再消化。如仍不能奏效,可能的原因是 DNA 样品中有太多的杂质,或酶的活力下降。消化后的 DNA 加入 1/10
(1)分析天平、台式天平 (2)刻度吸管 (3)具塞试管、试管架 (4)研钵 (5)离心机、离心管 (6)烧杯、量筒 (7)微量取样器 (8)分光光度计 3. 试剂 (1)牛血清白蛋白标准溶液的配制:准确称取100mg 牛血清白蛋白,溶于100mL 蒸馏水中,即为1 000μg/mL 的原液。 (2)蛋白
引物:5’-TGCACCATCTGTCACTCTGTTAACCTC-3’ 2) PCR扩增 (1) 在冰浴中对各样品制备PCR重要混合物,对每个样品均加入: 10X PCR缓冲液 5.0ml 25mmol/L dNTPs 混合物 0.4ul 40umol/L 16sr DNA引物 每种引物1.0ul 40umol/L pBR322 DNA 引物 每种 2.0ul pBR322 DNA 1pg/ml 2.0ul DNA聚合酶(5U/ml) 0.2ul 三蒸水 35.4ul 总量 45ul (2) 用无菌去离子水稀释样品为1:10
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