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文献和实验内的，而酶只有在甘油浓度 具体操作如下：在 1.5 mL 离心管中依次加入DNA（1 μg/μl）20 μg10× 酶切 buffer 4.0 μl限制性内切酶（10 U/μl）5.0 μl加 ddH2O 至 500 μl在最适温度下消化 1-3 hr。消化结束时可取 5 μl 电泳检测消化效果。如果消化效果不好，可以延长消化时间，但超过 6 hr 已没有必要。或者放大反应体积，或者补充酶再消化。如仍不能奏效，可能的原因是 DNA 样品中有太多的杂质，或酶的活力下降。消化后的 DNA 加入 1/10
（1）分析天平、台式天平 （2）刻度吸管 （3）具塞试管、试管架 （4）研钵 （5）离心机、离心管 （6）烧杯、量筒 （7）微量取样器 （8）分光光度计 3． 试剂 （1）牛血清白蛋白标准溶液的配制：准确称取100mg 牛血清白蛋白，溶于100mL 蒸馏水中，即为1 000μg／mL 的原液。 （2）蛋白
引物：5’-TGCACCATCTGTCACTCTGTTAACCTC-3’ 2) PCR扩增 （1） 在冰浴中对各样品制备PCR重要混合物，对每个样品均加入： 10X PCR缓冲液 5.0ml 25mmol/L dNTPs 混合物 0.4ul 40umol/L 16sr DNA引物 每种引物1.0ul 40umol/L pBR322 DNA 引物 每种 2.0ul pBR322 DNA 1pg/ml 2.0ul DNA聚合酶（5U/ml） 0.2ul 三蒸水 35.4ul 总量 45ul （2） 用无菌去离子水稀释样品为1:10
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