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1-{[3-Chloro-5-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl](methyl)amino}-5-[(2E)-3-(dimethylamino)prop-2-enoyl]-3-[(4-fluorophenyl)methyl]-1,2,3,4-tetrahydropyrimidine-2,4-dione CAS号 338399-45-4
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文献和实验和运行时可作为样品的pH 指示剂(图 3A)。常用染料包括溴酚蓝、二甲苯青、苯酚红、和橙色 G。选择上样缓冲液时,需注意染料的表面迁移(s)(图 3B, 表 5 和 6)以避免遮盖目的核酸条带,特别是分子大小接近时(图 3C)。染料遮盖会影响目的条带的分析和量化,导致结果不可靠。 图 3. 中性pH中染料颜色。(B)在 TAE 和 TBE 缓冲液中不同百分比琼脂糖里的染料迁移。(C)在可视化过程中染料阴影遮盖条带。 3. 运行电泳 在凝胶、标准品和样品制备后,进行电泳。拆卸梳子和添加电泳缓冲液
计算出底物消耗速度或产物生成速度,将速度换算为μmol/min即是以国际单位表示的酶活性。 例如: 假设某一样品种的酶活性记为X U/L,取样品量VS(mL)与底物缓冲液Vr(mL)孵育,t min后加入终止液Ve(mL),检测到的净吸光度增加为A,该产物的摩尔消光系数为ε(一般可通过带标准求得),比色皿光径为 b cm。③ 连续监测法计算 酶与底物在特定条件下孵育,每隔一定时间(2-60 s)连续测定酶促反应过程中某一底物或产物的特征信号的变化,从而计算出每分钟的信号变化速率。连续监测法
7.4的0.01mol/L的PBS液。4℃贮放备用。 (2)2—cis( )3 H—ABA液(干粉),3瓶(0.2μCi/瓶)。每瓶干粉加3.5ml PBS液溶解,每50μl含有7000─9000cpm(计数率62%)。避光,-20℃保存备用。 (3)2─cis( )ABA标准液(干粉),5瓶。每瓶加1ml PBS液溶解,每50μl分别含有300、600、1200、2400、4800pg ABA。避光,-20℃保存备用。 (4)兔抗2─cis(±)ABA抗体
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