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核系统酵母文库(酵母文库构建/
企业认证
南京瑞源生物
核系统酵母文库服务
▼ 技术原理
酵母双杂交系统是一种鉴定活细胞内蛋白质相互作用的研究方法,其原理是:Gal4转录因子由DNA结合域(binding domain,BD)和转录激活域(active domain,AD)组成,二者可以分开独立表达为有功能的蛋白。当二者在物理空间上靠近时可以表现出完整的转录因子活性,基于此,把目的蛋白分别与BD、AD融合表达,当目的蛋白发生互作时,使得BD、AD在物理空间可以靠近,这时就能够表现出完整的转录因子功能,从而激活下游基因的表达。
▼ 服务简介
酵母双杂是一种利用酵母表达系统分析蛋白质相互作用的技术,它具有高度敏感性和广泛应用性。南京瑞源生物是一家专业从事酵母双杂服务的公司,自成立以来,我们始终致力于提升酵母双杂技术的水平和质量。我们的团队拥有多年的酵母双杂筛选经验,能够根据客户的需求。我们以诚信和专业为原则,对待每一位客户和每一个项目,保证反馈真实可靠的结果和数据。
▼服务优势
质量保证:进行2次筛选(三缺→四缺),保证筛选结果;交付标注:实验报告、结果图片、高通量测序+GO、KEGG分析、报告解读文档;测序方式:除一代测序,提供NGS测序与分析,确保全部克隆被鉴定;生信分析:专业的生信团队进行移码分析(不移码数量≥8),功能注释,GO和KEGG分析;售后服务:耐心与客户沟通交流,保证交付满意度
▼ 应用领域
▼ 服务流程
▼ 交付展示
▼服务内容
酵母文库构建
基本实验步骤
详细实验步骤
周期
交付材料
RNA提取
RNA提取 mRNA分离
5天
酵母双杂文库甘油菌1.5ml EP管(4管)
酵母双杂文库质粒1.5ml EP(4管>400ug)
文库库容量>1*107CFU
平均插入片段0.8 - 1.5 kb (因物种而异)
空载率<5%
Word文档电子版项目报告
cDNA文库构建
cDNA合成与接头连接
cDNA按长度分离
均一化处理(可选)
重组到酵母双杂交载体pGADT7上和电转化
文库检测和质粒提取
数据整理和分析
21天
酵母双杂交文库筛选
自激活检测
诱饵质粒的自激活检测
10天
阳性克隆测序结果(根据测序结果而定)
Word文档电子版项目报告(含实验数据)
文库筛选
诱饵质粒与文库质粒共转
酵母筛选的条件优化
筛选结果测序
30天
回转验证
筛选结果回转验证
阳性克隆酵母质粒
阳性克隆酵母菌株
一对一验证
实验组:pGBKT7-A+pGADT7-B
阳性对照 阴性对照
▼ 案例展示
1. 严格的自激活检测与3AT浓度
2. 高标准的回转验证
3. 克隆比对及移码分析
4. 全克隆NGS测序,简单易懂的结果呈现
▼ 相关试剂盒
酵母单杂交试剂盒
RY8009
常温保存,引物溶解后4℃保存,菌株溶解后加适量甘油-80℃保存。
点击了解产品详情
酵母TF单杂筛选试剂盒
RY8012
酵母核体系双杂交试剂盒
RY8008
酵母膜双杂交试剂盒
RY8010
酵母三杂交试剂盒
RY8011
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