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充足
- 英文名:
ChamQ Blue Universal SYBR qPCR Master Mix
- 供应商:
南京诺唯赞生物科技股份有限公司
- 规格:
500 rxns/2500 rxns
| 规格: | 500 rxns | 产品价格: | ¥1200.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 2500 rxns | 产品价格: | ¥5410.0 |
ChamQ Blue Universal SYBR qPCR Master Mix
蓝色通用型染料法qPCR 检测试剂盒

基因表达差异分析;绝对定量分析
• 广阔的定量阈:预混液在宽广的模板区间具有优异的线性关系;
• 扩增高度特异:降低引物二聚体和非特异性扩增的产生概率,使检测数据更具可靠性;
• 程序兼容性强:兼容标准程序和快速程序进行定量,能够缩短反应时间;
• 广泛的平台适用性:特殊的ROX参比染料,适用于多种qPCR仪,无需在不同的仪器上调整ROX浓度。

本产品是使用SYBR Green 嵌合荧光法进行PCR反应的专用预混液,颜色为蓝色,便于加样。核心组分Champagne Taq DNA polymerase为一种新型的抗体法热启动DNA聚合酶,具有特异性强、检测灵敏度高等诸多优点,配以针对qPCR优化的Buffer以及特异性促进因子,非常适合于进行高特异性、高灵敏度的PCR反应。本产品中含有特殊的ROX Passive Reference Dye,适应于多种PCR仪器,无需在不同的仪器上调整ROX的浓度,只需在配制反应体系时加入引物和模板即可进行扩增。

1. 广阔的定量阈
将拟南芥cDNA进行5个10倍梯度稀释,使用ChamQ Blue Universal SYBR qPCR Master Mix (Vazyme#Q312)预混液扩增GAPDH基因(机型:ABI QuantStudio 3)。结果显示Vazyme #Q312在广阔的模板量区间内具有优异的线性关系。



2. 扩增高度特异
以293 gDNA和Hela cDNA为模板,使用Vazyme #Q312预混液及其他品牌染料法qPCR试剂,在同样反应条件下分别扩增3个不同的基因(机型:ABI QuantStudio 3)。结果显示,在不同扩增体系上,与同类产品相比,Vazyme #Q312预混液特异性更高。









3. 程序兼容性强
图A是Vazyme #Q312在不同仪器标准程序和快速程序反应时间对比,图B是将水稻叶片cDNA 样本进行5个10倍梯度的稀释,使用Vazyme #Q312预混液检测基因的表达,分别选择标准程序和快速程序上机(机型:ABI QuantStudio 3)。结果显示,Vazyme #Q312预混液能够兼容标准与快速程序的定量检测。

图A
图B



-30 ~ -15℃避光保存,-20℃存放18个月;Master Mix解冻后可于2 ~ 8℃避光条件下稳定存放1个月;37℃存放7天;可冻融50次,≤ 0℃运输。配制好的混合体系(引物、模板、试剂)可于2 ~ 8℃放置6h。
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文献和实验成功做完了逆转录,这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多,即使使用了 qPCR 预混液,也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列(Q411 /Q421 /Q431 /Q441)提供不同颜色的试剂,利用移液过程中的变色效应,追踪移液过程,可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时,引物设计需遵循以下原则:引物长度 18~25bp,产物长度 80~300bp,GC 含量 40~60
RNase H活性缺失的莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶(M-MLV Reverse Transcriptase)的高效反转录合成单链cDNA的试剂盒; All-in-One? qPCR Mix 基于SYBR Green的All-in-One? qPCR 检测试剂盒; All-in-One? miRNA qRT-PCR Detection Kit 采用Poly A加尾法的miRNA qPCR 检测试剂盒;
是由于体系内引物与引物纠缠比引物与模板结合更容易导致的,可以尝试提高模板浓度、退火温度或者降低引物浓度来进行改善; 另外,当目的基因表达量极低时,染料法容易形成引物二聚体产物影响实验结果,此时,建议使用探针法定量。 (2)杂峰在主峰之后,非引物二聚体 上图这种情况就是非特异性扩增,可能是引物特异性不好引起的,也可能是空气中有气溶胶污染所导致。 大家可以先增加退火温度再试试看,如果没有改善,那么就需要重新更换引物啦。为了避免这种麻烦,小 V 建议大家在进行 qPCR 实验之前,就对自己的引物











