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充足
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miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)
- 供应商:
诺唯赞
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-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。
- 规格:
20 rxns/40 rxns
| 规格: | 20 rxns | 产品价格: | ¥2000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 40 rxns | 产品价格: | ¥4200.0 |
miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)
miRNA加尾法逆转录试剂盒

逆转录;miRNA加尾法合成第一链cDNA

优异的逆转录性能:Vazyme #MR201具有更优异的逆转录性能
较高的逆转录特异性:专为miRNA加尾法逆转录定向改造的逆转录酶,较大限度降低miRNA前体的逆转录
简便快捷的操作:加尾和逆转一步完成

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)是适用于microRNA (miRNA)加尾法合成cDNA的专用试剂盒,只需一步操作,即可完成加尾反应和逆转录反应。本产品以miRNA或总RNA为模板,在Poly A polymerase (PAP)的作用下,在其3'末端加Poly (A),随后使用通用逆转录引物进行逆转录反应。本产品中,HiScript miRNA Enzyme Mix包含专为miRNA逆转录定向改造的逆转录酶和PAP,配以优化的缓冲体系,在具有高灵敏度的同时,较大限度降低miRNA前体的逆转录,保证后续结果稳定可靠。

1. 简便快捷的操作
一步操作完成加尾反应和逆转录反应

2. 优异的逆转录性能
以HeLa miRNA为模板(100 ng/μl),使用 Vazyme #MR201 以及品牌相关产品,按照各自说明书推荐程序进行逆转录反应,将得到的cDNA分别在六种引物体系(T1/2/5/12/15/20)中进行qPCR定量分析。从图中可以看出,除两个体系中存在部分ΔCT<-0.5,其余均ΔCT>0.5或-0.5<ΔCT<0.5,说明Vazyme #MR201的逆转录效率优于同类产品。

注:ΔCT = CT(竞品)– CT(Vazyme)
3. 较高的逆转录特异性
以HeLa miRNA为模板(100 ng/μl),分别使用专为miRNA逆转录定向改造的逆转录酶(Vazyme #MR201)和未定向改造的逆转录酶(其余组分与Vazyme #MR201一致)进行逆转录反应,在相同条件下对逆转录反应得到的cDNA进行qPCR检测2个体系。可以看到,使用Vazyme #MR201逆转录miRNA后qPCR检测得到的溶解曲线单峰且峰形优异,特异性更高。




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文献和实验子,QIAGEN自有妙招,即便是FFPE组织标本,采用经典的硅胶膜选择吸附离心柱,配上优化好的各种buffer,可以快速纯化出所有大于18个核苷酸的RNA。另外还提供Protocol用于单独富集 第二步是逆转录反应,这里就有别于普通的针对mRNA的RT反应了,因为真核生物mRNA都是有poly-A尾巴的,这样Oligo-dT逆转录引物就很容易结合到mRNA上来合成cDNA了。miRNA就缺了poly-A尾巴,于是QIAGEN的对策就是在RT kit里加了poly(A) polymerase先给那些无poly
Differential cDNA Screening Procedures
1. To the dried cDNA pellet add the following: 1st strand cDNA 10.0 ul 0.4M Hepes pH 7.6 25.0 ul 6O mM MgCl2 10.0 ul 1.0 M DTT 1.0 ul 1.O M KCl 6.0 ul 5.O mM dNTP mix 10.0 ul 10 mM B
混匀,短暂离心后放置冰上待用。 2. 冰上进行Q-PCR 反应液的配制(所有miRNA 进行复孔测试,同时进行单孔NTC(No template control)测试) 试剂组分 体积 终浓度 2×All-in-OneTM Q-PCR Mix 10ul 1× All-in-OneTM miRNA Q-PCR Primer(2μM)2ul 0.2uM Universal Adaptor PCR Primer (2μM)2ul 0.2uM 1st strand cDNA(5 倍稀释











