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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 水牛源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4269 |
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
包装规格及成分:
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
公司正在出售的产品:
| Pig hea muscle oponin I (cTn- I) ELISA Kit 猪心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒 | Anti-Tubb3/FITC 荧光素标记β微管蛋白-Ⅲ抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 小鼠Toll样受体7(TLR7)免疫试剂盒 Mouse Toll-like receptor 7,TLR7 ELISA Kit | Anti-PAK2 /FITC 荧光素标记p21激活激酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Mouse myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 小鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 | Anti-CCR-10/FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体10抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Human plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 人纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒 | Anti-HOXB4 HOXB4抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
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| Rat collagen type III (Col III) ELISA Kit 大鼠Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA试剂盒 | Anti-Phospho-delta Opioid Receptor (Ser363) /FITC 荧光素标记0酸化D型受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
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| Rat urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒 | Anti-Cyclin E 周期素E抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| 人血清素/血清胺(ST)ELISA检测试剂盒HumanSerotonin,STELISAKit 96T/48T | 水牛源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒Anti-EEF2k/FITC 荧光素标记真核延伸因子激酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 猪游离甲状腺素(FT4)免疫试剂盒 Pig free thyroxine,FT4 ELISA kit | Anti-Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) 0酸化单丝氨酸蛋白激酶1/2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| 兔子CD34分子(CD34)免疫试剂盒 Rabbit cluster of differeiation 34,CD34 ELISA Kit | Anti-Phospho-NDRG1 (Thr346) 0酸化分化相关基因NDRG1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
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文献和实验微笑刺客521 我是想提取RNA,然后在反转录,最后做荧光定量PCR。我用的标本是Hep-2喉癌细胞株,试剂盒是Biomiga_EZgeneTM Biozol RNA kit,每次收集50ml培养瓶里面的细胞,但是总是提取不出来RNA,条带上面也没有,郁闷之极,求解~ athena王 难道降解了? biolinkphilic 尝试用其它提取方法,不妨用传统的提取法或许有意想不到的效果
相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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