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- 单细胞悬液制备已经广泛应用于生物、医药等科研领域。在细胞学分析、医学诊断、细胞疗法领域有广泛应用。可用于流式细胞术、单细胞测序、原代细胞的分离
- 上海
- 2026年04月28日
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- 提供商：
上海研匠生物科技有限公司
- 服务名称：
组织单细胞悬液制备
- 规格：
每样本
肿瘤组织单细胞悬液的制备方法
单细胞悬液制备已经广泛应用于生物、医药等科研领域。在细胞学分析、医学诊断、细胞疗法领域有广泛应用。可用于流式细胞术、单细胞测序、原代细胞的分离。
实验材料：
肿瘤组织消化液(终浓度为0.1% 的胶原酶,0.01% 透明质酸酶,0.002% 的DNA 酶)
实验步骤:
取手术切除的新鲜肿瘤组织, 无菌生理盐水冲洗干净, 剪成1mm 3 大小的碎块, 加入肿瘤组织消化液, 37 ℃消化2 小时, 100 目尼龙网过滤, 500 r/m in 离心10 m in, 弃上清, 加入适量Hanks 液, 混匀后行不连续密度梯度离心, 2000 r/min 20 min, 收集富含肿瘤细胞的悬液, 洗涤2 次后, 用含10 % 血清的1640 培养液调整细胞数至实验备用。
实验注意事项：
纤维化重的如：乳腺癌，肺癌、胃肠癌肿瘤的消化用胶原酶3，浓度100-150u/L,消化3-4小时，其间要吹打。过滤是用300目尼龙膜好。纤维化低的如：肝癌、卵巢癌的消化用透明质酸酶或者胰酶等，时间与浓度有关，参考使用说明书。
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文献和实验人外周血单细胞悬液制备流程 1.采集人外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入100 μL新鲜血和2 mL 1×红细胞裂解液，混匀，4℃裂解10 min。 300 g离心5 min（裂解完立即离心，防止时间过长损伤细胞），弃上清，得到白色细胞沉淀。 PBS洗涤一次。 加入100 μL细胞染色缓冲液重悬细胞，不用计数，即可进行后续流式抗体染色实验。按照100 μL新鲜血样本制备的单细胞悬液，加入1 Test对应的流式抗体混匀进行后续实验。 注意事项： 1. 采血用抗凝管，有肝素和EDTA两种
小鼠腹水及单细胞悬液制备流程 配制 6% 淀粉肉汤。 6% 淀粉肉汤配制方法：牛肉膏 0.3g、蛋白胨 1.0g、氯化钠 0.5g、蒸馏水 100mL，上述材料混合加热后加入可溶性淀粉 6.0g；溶解后，121℃ 高压灭菌 15~20 min，EP 管分装封口，将肉汤放置于 4℃ 保存。 小鼠腹腔注射 1mL 6% 淀粉肉汤（注意避开肠管和内脏），刺激 60~72h。 颈椎脱臼法处死小鼠，用 75% 酒精浸泡小鼠 5min。 将小鼠置于解剖板中，固定四肢，剪开皮肤，充分暴露腹膜。 用眼
小鼠外周血单细胞悬液制备 采集小鼠外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入 100 μL 新鲜血，加入 1 Test 对应流式抗体，混匀，4℃ 避光孵育 30 min。 加入 2 mL 1×红细胞裂解液，混匀，4℃ 裂解 5 min。 300 g 离心 5 min（裂解完立即离心，防止时间过长损伤细胞），弃上清可得到白色的细胞沉淀。 PBS 洗涤一遍。 加入 200 μL 细胞染色缓冲液重悬细胞，用流式细胞仪进行检测和分析。 注意事项： 采血用抗凝管，有肝素和 EDTA 两种，若直接裂解
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