细胞冻存盒，适配12 × 1ml或2ml冷冻管

类器官培养与应用——结直肠类器官

清洗后，再次 4℃ 条件下 300g 离心 5min。 17、将所得沉淀按照 1:3-1:5 的比例重复 10-13 步骤（具体比例通过类器官的汇合度确定），完成传代。   类器官冻存 18、取 1-2 个孔的类器官，消化离心后取细胞沉淀，加入 1ml 细胞冻存液。 19、将细胞重悬后转移至冻存管中，利用程序降温盒缓慢降温至 -80℃。 20、第二天，将样品转移到液氮中长期储存。   类器官复苏 21、将液氮冻存的 CRC 类器官放置在 37℃ 水浴锅中进行解冻，水浴时间不宜超过 2min。 22

小鼠脑神经瘤细胞概述及培养方法！

1-2mL 培养液后吹匀。 4、将细胞悬液按 1：2 到 1：5 的比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 注：第一次传代推荐传代比例为 1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。 下面 T25 瓶为例 1、细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗瓶底 1-2 次后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱落后，加入 2ml 完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2、1000RPM 离心 5 分钟去掉上清。用血清重悬浮，加 DMSO

培养细胞的保存和复苏

长期保存。（4）复苏：急速融化复苏可防止损害细胞。冻结细胞从液氮中取出后，应立即放入37℃~43℃的水浴中，30秒至一分钟内融化。2、冻存与复苏方法适用于原始组织、原代细胞和细胞系（株）。（1）细胞用胰蛋白酶+EDTA消化后用冻存液稀至2~5X106/ml。（2）分装于2ml冻存管中，装量1ml，封口，作好标记，用几层纱布扎好。（3） 冻存管进入液氮前应有一个渐降温的过程，以1℃/min的速度降温，一般挂在液氮上空8小时后，投入液氮贮存罐中长期保存。（4）为使冻存的细胞复苏，将冻存管置于37℃~43℃水浴中，充分