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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
58
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100Tx25μl
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| HotStart Bst 4.2 SYBR Green Bead(荧光冻干球) | BJ-PJ6574 | 100Tx25μl | 2730 |
描述:
本品为 LAMP 荧光检测专用的试剂,制品为全体系冻干微球制品,包含了 HotStart Bst4.2 DNA/RNA 聚合酶、SYBR Green 染料、Helicaser、dNTP、Mg2+、反应缓冲盐,单球扩增体系为 25 μl。
Bst4.2 具有以下性能:
(1)Bst 4.2 全系包含热启动Aptamer,该配体确保酶在<30℃时,酶活封闭效率>95%,在>60℃时 1min 内完全释放酶活。该特性利于室温建立反应体系,并大幅降低了低温条件下的非特异扩增;
(2)反应温度提升到 70℃,大幅降低引物 Dimer 的形成,提高扩增特异性,并使得粗样品核酸释放更加充分;
(3)全系包含 Helicaser,因此,允许在不使用 F3/B3 引物的情况下进行 LAMP 扩增(easy LAMP),并允许 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。这将进一步降低非特异扩增,并使得扩增均一性大幅提升。
储存:-20℃干燥密封保存 24 个月;室温(25℃)密封保存 12 个月。避免受潮。
特殊说明:
(1) Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 扩增时的推荐反应温度为 65-70℃,最佳反应温度为 70℃。因此其可完全替代 的 Bst4.0 系列,用于标准 LAMP的扩增。
(2) 由于 Helicaser 的反应温度为 70℃,因此在进行eLAMP 扩增时,反应温度为 70℃。
(3)制品中包含高浓度的盐组分,使用时做好个人防护,防止制品与皮肤、眼、鼻、呼吸道等接触和吸入,一旦接触或吸入,请用大量的清水冲洗。
(4)防止气溶胶污染,尽可能进行分区操作。
1. 标准 LAMP 和 eLAMP 扩增的区别本试剂既可以用于标准 LAMP 扩增,也可以用于 eLAMP扩增。
1.1 10x 标准 LAMP Primer MixFIP/BIP=16 μM each; LF/LB=4 μM each; F3/B3=2 μM each
1.2 10xeLAMP Primer MixFIP/BIP=8 μM each; LF/LB=4 μM each
注意:eLAMP(easy LAMP)为去除 F3/B3 引物的方法,为 Bst4.2系列专用的使用策略,对于大多数引物组,在 Helicaser 的加持下,扩增速度几乎不受影响。如引物扩增效率低,可提高 FIP/BIP 浓度到 12~16 μM。
1.3 扩增温度不同
标准 LAMP 扩增 eLAMP 扩增
65-70°C 均可 70°C 反应
2. 配制 LAMP 反应体系
HotStart Bst 4.2 SYBR Green Bead 1 个
10x Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到总体积 25 μl
反应体系配好后,置于 65-70°C 反应 20~30min,1min 收集一次荧光信号。读取扩增曲线进行阴性和阳性判读。
| 大鼠尿道组织提取物【Urethra: Normal Rat Urethra Derivatives】 | 人前列腺成纤维细胞完全培养基 100mL | Phospho-FGFR1 (Tyr307): 0酸化碱性成纤维细胞生长因子受体1抗体 0.1ml |
| hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞BAEE盐酸-Na-本甲酰-L-精酸乙酯10克BR,98% | SW 1990(人胰腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | Anti-Phospho-HDAC3 (Ser424)/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠0酸化组蛋白去乙酰化酶3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
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| HSF人皮肤成纤维细胞 HSF in human skin fibroblasts DMEM+10%FBS或者(进口的新生牛血清NCS)2,4,5-三拂本醋 2,4,5-Trifluorophqnylccqtic ccid 09992-38-0 | 人绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)ELISA检测试剂盒HumanChorionicGonadoophinβ,β-HCGELISAKit 96T/48T | PSMD7: 蛋白酶调解因子7抗体 0.2ml |
| 小鼠脉络膜血管细胞【Mouse Choroid: Normal Choroidal Vascular Cells】 | 培养瓶 175cm2培养瓶 5个/包,40个/箱 | Rhesus antibody Rh PMCA1 细胞膜钙ATP酶1抗体 规格 0.2ml |
| HUVEC(HUV-EC-C) (人脐静脉血管内皮细胞) 5×106cells/瓶×2N-去甲基-4-羟基它莫西芬-d5 (1:1 E/Z 混合物)N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (1:1 E/Z Mixture) | N Rm 黑化大家鼠肺成纤维细胞 1ml/T75 | Rhesus antibody Rh GRPP 胰高血糖素相关肽抗体 规格 0.2ml |
| Bel-7405细胞,人肝癌细胞 逆转录病毒包装用的人胚胎成纤维细胞,PA317细胞 叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21改良番茄汁培养基shēng huà shì jì容量:500毫升 | HotStart Bst 4.2 SYBR Green Bead(荧光冻干球)人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA检测试剂盒HumanBoneMorphoeticProtein6,BMP-6ELISAKit 96T/48T | CD117/c-kit/SCFR 干细胞生长因子受体/细胞表面分化抗原(抗原) 0.5mg |
| PrimaCell™人胶质瘤组织源细胞试剂盒 | 大鼠小脑颗粒细胞完全培养基 100mL | Placental lactogen I+II: 胎盘催乳素1/2抗体 0.2ml |
| 细胞冻存液CFM丁1基苯酞(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品川芎提取,液体3-Butylidenephthalide | HLF-a(人肺细胞) 5×106cells/瓶×2 | Elisa荷兰赛迪口蹄疫0型2板2*96孔2*96孔 |
| 人成纤维细胞 (HLF)( 5×105 ) 细胞名称 种属N-去甲基特比萘芬N-Desmethyl Terbinafine | 人CXC趋化因子受体4(CXCR4)免疫试剂盒 Human CXCR4 ELISA Kit | 血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪酸激酶2(Tie-2)elisa试剂盒 |
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文献和实验3.RNA逆转录引物的选择引物主要有三种:1.随机引物:随机引物,特别是6nt引物对所有的靶位点不产生十分稳定一致的结果,建议使用15nt的随机引物.2.oligo-dT:只能用于mRNA完整的样品,特别有polyA .而且对于一些特殊的变异体以及较长的3’UTR的区域比较困难3.特异引物:最特异最灵敏的方法。特别RNA量足够情况下建议使用此法。PCR 优化PCR优化主要有:1.引物的浓度2.建议使用SYBR Green I和EvaGreen 进行扩增和溶解曲线的测试笔者建议的操作流程:I.靶的选择
2: Analysis of Chromatin Immunoprecipitation Experiments by Real‐Time Quantitative PCR with SYBR Green Reagents and Solutions Commentary Literature Cited Figures
Selection of a Platform for Mutation Detection
PCR using SYBR‐green dye. Hum. Mutat. 23:368‐378. Boddicker, J.D., Rota, P.A., Kreman, T., Wangeman, A., Lowe, L., Hummel, K.B., Thompson, R., Bellini, W.J., Pentella, M
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