大鼠心肌成纤维细胞(永生化)

大鼠心肌成纤维细胞(永生化)

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  • ¥3500
  • 南京万木春
  • 进口/国产
  • 23XR354
  • 2025年11月21日
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      南京万木春

    • 肿瘤类型

      /

    • 细胞类型

      永生化细胞

    • 品系

      /

    • 组织来源

      /

    • 相关疾病

      /

    • 物种来源

      /

    • 免疫类型

      /

    • 细胞形态

      /

    • 是否是肿瘤细胞

    • 器官来源

      /

    • 运输方式

      常温/干冰

    • 年限

      三代内

    • 生长状态

      .

    • 规格

      1×10^6/T25方瓶

    永生化大鼠心肌成纤维细胞简介:

    虽然原代大鼠心肌成纤维细胞更能真实地反映心肌成纤维细胞在大鼠体内的生理状态,但是一方面原代分离培养大鼠心肌成纤维细胞周期长及对技术人员经验要求较高,另一方面此原代细胞生长较慢及在体外不能多次传代,这些不利因素制约了原代大鼠心肌成纤维细胞在实验室的广泛应用。我公司的研究团队拥有多年原代细胞分离培养及细胞永生化服务研究经验,成功建立了永生化大鼠心肌成纤维细胞。
    心脏是脊椎动物身体中最重要的一个器官,主要功能是提供压力,把血液运行至身体各个部分。心脏的作用是推动血液流动,向器官、组织提供充足的血流量,以供应氧和各种营养物质,并带走代谢的终产物(如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等),使细胞维持正常的代谢和功能。心脏中,心肌成纤维细胞约占正常心肌组织细胞总数的60%-70%,是心脏中非心肌细胞的主要组成部分,广泛存在于心脏组织中,包围心肌细胞,连接心肌细胞间质,与缺血性心脏病、炎症、肥大、梗死等病理状态密切相关。
    本公司生产的永生化大鼠心肌成纤维细胞采用酶解法和基因转染制备而来,细胞总量约为1×106/T25方瓶,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    二、 使用方法

    1 您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:

           取出 T25 方瓶, 75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入 37 , 5%CO2 细胞培养箱中静置 2-3 小时, 以稳定细胞状态,然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液(备注: 先使用瓶子中完全培养液培养及尽快冻存保种细胞, 保存种子后再尝试自己完全培养液培养观察是否适合此细胞生长,以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡 最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。
    2 、细胞传代:
           1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液,  PBS 清洗细胞 3 次;
          2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min
            3)弃上清,沉淀细胞用 10ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代, 最后放入 37 ,5%CO2 胞培养箱中培养;
            4)待细胞完全贴壁后, 观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
    3 、细胞冻存
           1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞 3 次;
           2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min
            3)用适当量的冻存液(完全培养液: FBSDMSO=7:2:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
            4)先将细胞冻存管放置于-20 1h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期储存(或者按照梯度程序降温模式直接放置-80 度冻存后并转移液氮中长期储存)。
    4、细胞复苏:
           1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具 快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;

           2)将冻存管中的细胞转移至含 5ml 完全培养液无菌离心管中,1000rpm 离心 5min ,然后加入 5ml 全培养液混匀细胞, 将细胞悬液转移至 T25 培养瓶中, 放置于 37 , 5%CO2 细胞培养箱中培养;
          
    3
    第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

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