万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
/
- 库存:
现货库存
- 供应商:
南京万木春
- 肿瘤类型:
/
- 细胞类型:
永生化细胞
- 品系:
/
- 组织来源:
/
- 相关疾病:
/
- 物种来源:
/
- 免疫类型:
/
- 细胞形态:
/
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 器官来源:
/
- 运输方式:
常温/干冰
- 年限:
三代内
- 生长状态:
.
- 规格:
1×10^6/T25方瓶
一、永生化小鼠脑周细胞简介:
虽然原代小鼠脑周细胞更能真实地反映脑周细胞在小鼠体内的生理状态,但是一方面原代分离培养小鼠脑周细胞周期长及对技术人员经验要求非常高,另一方面此原代细胞在体外培养生长较慢,传代次数有限,这些不利因素制约了原代小鼠脑周细胞在实验室的广泛应用。我公司的研究团队拥有多年原代细胞分离培养及细胞永生化服务研究经验,成功建立了永生化小鼠脑周细胞。周细胞是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞,可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中,通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯,监视和稳定内皮细胞的成熟过程。在大脑中周细胞帮助维持血脑屏障,周细胞是大脑神经血管单位的重要组成部分。此外,周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用。
本公司生产的永生化小鼠脑周细胞采用酶解法和基因转染制备而来,细胞总量约为1×106/T25方瓶,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
二、 使用方法
1 、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出 T25 方瓶, 75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中静置 2-3 小时, 以稳定细胞状态,然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液(备注: 先使用瓶子中完全培养液培养及尽快冻存保种细胞, 保存种子后再尝试自己完全培养液培养观察是否适合此细胞生长,以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡) ,最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。
2 、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液, 用 PBS 清洗细胞 3 次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 10ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代, 最后放入 37℃ ,5%CO2 细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后, 观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3 、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞 3 次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min;
3)用适当量的冻存液(完全培养液: FBS:DMSO=7:2:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期储存(或者按照梯度程序降温模式直接放置-80 度冻存后并转移液氮中长期储存)。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具) ,快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞转移至含 5ml 完全培养液无菌离心管中,1000rpm 离心 5min ,然后加入 5ml 完全培养液混匀细胞, 将细胞悬液转移至 T25 培养瓶中, 放置于 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中培养;
3)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
年龄越大年龄越大血脑屏障泄露越严重?Nature 最新研究对传统认知说不!血脑屏障泄露越严重?Nature 最新研究对传统认知说不!
蛋白的跨 BBB 运输和我们想的不太一样。 为了进一步探究其中的奥秘,作者将它们年轻小鼠大脑血管内皮细胞的单细胞 RNA 测序数据与公开的年老小鼠数据进行了对比。在年老血管内皮细胞中下调的基因中,有 85% 和年轻小鼠血管内皮细胞中与血浆吸收相关的基因重合。作者也发现这种下调导致了年老小鼠脑内受体介导的转胞吞作用(receptor-mediated transcytosis,RMT)缺陷。一系列 RMT 相关的受体和下游基因在年老大脑血脑内皮细胞中出现了下调,年老小鼠中也出现了更多的配体非特异性窝舟转
技术资料小鼠脑周细胞(永生化)
¥3500





