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小鼠肝Kupffer细胞(永生化)

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  • 南京万木春
  • 进口/国产
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  • 2026年03月21日
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      南京万木春

    • 肿瘤类型

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    • 细胞类型

      永生化细胞

    • 品系

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    • 是否是肿瘤细胞

    • 器官来源

      /

    • 运输方式

      常温/干冰

    • 年限

      三代内

    • 生长状态

      .

    • 规格

      1×10^6/T25方瓶

    永生化小鼠肝 Kupffer 细胞

    一、 产品简介

     1 、产品名称: 永生化小鼠肝 Kupffer 细胞(Immortalized Mouse Hepatic Kupffer Cells)

    2 、细胞来源: 原代小鼠肝 Kupffer 细胞

    3 、产品规格: 1×106 细胞/T25 方瓶

    4 、细胞简介:

       本公司生产的永生化小鼠肝 Kupffer 细胞采用体外多步灌注和密度梯度离心法及 SV40T 慢病毒制备而 来,细胞总量约为 1×106/T25 方瓶, CD163 呈阳性,细胞纯度可达 90%以上,且不含有 HIV- 1 、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

    培养基信息:

    我们推荐使用研制的永生化小鼠肝 Kupffer 细胞专完全培养基(高糖DMEM+10%FBS+1%双抗)作为体外培养永生化小鼠肝 Kupffer 细胞的培养基。

    二、 使用方法

     1 、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:

    取出 T25 方瓶, 75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中静置 2-3 小时, 以稳定细胞状态,然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液(备注: 先使用瓶子中完全培养液培养及尽快冻存保种细胞, 保存种子后再尝试自己完全培养液培养观察是否适合此细胞生长,以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡) ,最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。

    2 、细胞传代:

    1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液, 用 PBS 清洗细胞 3 次;

    2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37℃培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min;

    3)弃上清,沉淀细胞用 10ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代, 最后放入 37℃ ,5%CO2 细胞培养箱中培养;

    4)待细胞完全贴壁后, 观察培养结果,之后进行换液培养或传代。

    3 、细胞冻存:

    1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液, 用 PBS 清洗细胞 3 次;

    2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37℃培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min;

    3)用适当量的冻存液(完全培养液: FBS:DMSO=7:2:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;

    4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期储存(或者按照梯度程序降温模式直接放置-80 度冻存后并转移液氮中长期储存)。

    4、细胞复苏:

    1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具) ,快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;

    2)将冻存管中的细胞转移至含 5ml 完全培养液无菌离心管中,1000rpm 离心 5min ,然后加入 5ml 完全培养液混匀细胞, 将细胞悬液转移至 T25 培养瓶中, 放置于 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中培养;

    3)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

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