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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
/
- 库存:
现货库存
- 供应商:
南京万木春
- 肿瘤类型:
/
- 细胞类型:
原代细胞
- 品系:
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- 组织来源:
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- 相关疾病:
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- 物种来源:
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- 免疫类型:
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- 细胞形态:
/
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 器官来源:
/
- 运输方式:
常温/干冰
- 年限:
/
- 生长状态:
/
- 规格:
5×10^5/T25方瓶
1 、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出 T25 方瓶, 75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中静置 2-3 小时, 以稳定细胞状态,然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液(备注: 先使用瓶子中完全培养液培养及尽快冻存保种细胞, 保存种子后再尝试自己完全培养液培养观察是否适合此细胞生长,以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡) ,最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。
2 、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液, 用 PBS 清洗细胞 3 次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 10ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代, 最后放入 37℃ ,5%CO2 细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后, 观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3 、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞 3 次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min;
3)用适当量的冻存液(完全培养液: FBS:DMSO=7:2:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期储存(或者按照梯度程序降温模式直接放置-80 度冻存后并转移液氮中长期储存)。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具) ,快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞转移至含 5ml 完全培养液无菌离心管中,1000rpm 离心 5min ,然后加入 5ml 完全培养液混匀细胞, 将细胞悬液转移至 T25 培养瓶中, 放置于 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中培养;
3)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验指成纤细胞、成肌细胞等一般未分化的细胞,血球时,则称为成血细胞。
发生的,且早期就已分化出来。在形态上有单细胞性和多细胞性的。前一种中有的有分支,有的没有分支,后一种有的是由一排细胞构成的,有的是由数排细胞构成的,并且有的也有分支。根据它们的形状可区分为乳头突起、刺毛、钩状毛、星状毛、鳞毛和囊状毛等。而根据毛的生长方式和方向可分为绒毛、绵毛和逆毛;根据毛的性质和机能特征,已知的有粘毛、触毛、腺毛、吸水毛、排水毛、吸收毛、消化毛、感觉毛、散布毛、浮囊毛和根毛等。这些毛都是由表皮烁胞的特殊伸长而成,或者由表皮细胞的连续进行几次细胞分裂形成,通常其表面被覆着角质层,有时也有炭
应力纤维 stress fiber 为存在于分裂间期细胞的纤维结构之一。单层培养的动物细胞,特别在成纤细胞更明显可见,多是沿细胞长轴方向长伸,其末端达至细胞膜。应力纤维进入细胞分裂期则消失。 M. Heidenhain( 1899)在固定的蝾螈胚细胞中发现细胞质性的纤维结构,接着又有在活细胞中存在同样的纤维结构的报道,以后也就把这种纤维结构称为应力纤维。现在,通过电镜观察和用荧光标记的 H-酶解肌球蛋白与纤维的结合的方法以及用肌动蛋白抗体的间接荧光抗体法等,了解到应力纤维主要是由肌
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