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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
T2(174×CEM.T2)
- 库存:
现货库存
- 供应商:
南京万木春
- 肿瘤类型:
/
- 细胞类型:
细胞系
- 品系:
/
- 组织来源:
/
- 相关疾病:
/
- 物种来源:
/
- 免疫类型:
/
- 细胞形态:
/
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 器官来源:
人淋巴母
- 运输方式:
常温/干冰
- 年限:
三代内
- 生长状态:
悬浮
- 规格:
1×10^6/T25方瓶
1 、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出 T25 方瓶, 75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中静置 2-3 小时, 以稳定细胞状态,然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液(备注: 先使用瓶子中完全培养液培养及尽快冻存保种细胞, 保存种子后再尝试自己完全培养液培养观察是否适合此细胞生长,以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡) ,最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。
2 、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液, 用 PBS 清洗细胞 3 次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 10ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代, 最后放入 37℃ ,5%CO2 细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后, 观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3 、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞 3 次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min;
3)用适当量的冻存液(完全培养液: FBS:DMSO=7:2:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期储存(或者按照梯度程序降温模式直接放置-80 度冻存后并转移液氮中长期储存)。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具) ,快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞转移至含 5ml 完全培养液无菌离心管中,1000rpm 离心 5min ,然后加入 5ml 完全培养液混匀细胞, 将细胞悬液转移至 T25 培养瓶中, 放置于 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中培养;
3)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
Összefoglaló. Bevezetés: A gyermekkori hirtelen szívmegállás ritka, de egy részük megelőzhető lehetne. Célkitűzés: Vizsgálatunk célja az volt, hogy a Magyarországon előforduló, kórházon kívüli gyermekkori szívmegállás gyakoriságát és hátterében az öröklődő arrhythmiaszindrómák jelentőségét megbecsüljük. Módszer: Három megközelítést alkalmaztunk. Elemeztük 1) az Országos Mentőszolgálat 2012. január 1. és 2015. június 30. közötti eseteinek Utstein-adatlapjait, 2) az Országos Gyermekszív Központba hirtelen szívmegállás miatt 2000. január 1. és 2021. augusztus 11. között felvett, valamint 3) az öröklött arrhythmiaszindróma
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文献和实验3时刻反应达到终点,t3-t2为测定时间。 反应度R=At3-At2-1×V/(V+S),或R=At3-ARBLK。 其中: Ati为i时刻的吸光度,ARBLK为试剂空白吸光度。 单试剂双波长终点法: 基本上同“单试剂单波长终点法”,只是对于每一个测定周期,其实际吸光度等于Aλ1-Aλ2。 双试剂单波长终点法:t1时刻加入第一试剂(体积为V1),t2时刻加入样本(体积为S)之后立即搅拌,t3时刻加入第二试剂(体积为V2) 并立即搅拌
系U937,细胞密度2×108/L,分对照组(N)、处理Ⅰ组(T1)、处理Ⅱ组(T 2),N用1640培养基及10%胎牛血清培养,T1用IFN-γ104U/L LPS 1μg/L、T2用IFN- γ10 U/L LPS l0μg/L分别刺激7h.1.2 主要试剂与仪器TRIzol试剂(GIBCO BRL)、Fluoro DD试剂盒(Genomyx)、Supersript Ⅱ逆转录酶(GIBCO BRL)、Ampli Taq DNA聚合酶(GIBCO BRL)、RNase-free DNaseI
免疫学研究室细胞库目录 1.癌细胞7株:LS174T, Culu, Lovo, SW111, Colon320, CT26(mouse), HT29 2.胃癌4株:MGC-80, Koto-III, PDGC, SGC-7901 3.胰腺癌2株:SW1990,CP 4.肺癌7株:A549, Calu-3,95D, PLA-801D, QSDA427, LGC, 7901 5.白血病2株:HL60, K562(ATCC) 6.肝癌3株:7721, ALEX, BEL-7402
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