四环素检定琼脂

支原体污染的特点及检验（3）

网友eming43的经验 支原体的检测． PCR法 原理 该法是通过PCR技术将支原体16srRNA基因特异性扩增，来检测培养细胞中污染的支原体。PCR引物选自16sr RNA基因上的支原体特异片段，此片段与其他细菌的序列无交叉性杂交反应。扩增产物用琼脂糖凝胶电泳，经溴乙啶（EB）染色后在紫外透射仪上进行检测。 u 16sr DNA引物用水稀释至40umol/L。　　（1）.正向引物：5’-ACTCCTACGGGAGGCAGCAGTA-3’　　（2）.反向

管碟法测定抗生素效价

一、目的和要求 1. 了解管碟法的原理。2. 掌握二剂量法测定抗生素效价单位的技术和计算方法。二、原理抗生素的生物检定是以抗生素对微生物的抗菌效力作为效价的衡量标准，具有与应用原理相一致、用量少和灵敏度高等优点。管碟法是琼脂扩散法中的一种，已被各国药典广泛采用，作为法定的抗生素生物检定方法。当抗生素在菌层培养基中扩散时，会形成抗生素浓度由高到低的自然梯度，即扩散中心浓度高而边缘浓度低。因此，当抗生素浓度达到或高于MIC（最低抑制浓度）时，试验菌就被抑制而不能繁殖，从而呈现透明的抑菌圈。根据扩散

Ames 试验（沙门氏菌回复突变试验）方法及导则

.1 组氨酸—生物素平板成分：琼脂粉 15 g蒸馏水 944mL(V-B)培养基E 20 mL20%葡萄糖 20 mL灭菌盐酸组氨酸水溶液(0.5 g / 100 mL) 10 mL灭菌 0.5 mmol/L生物素溶液 6 mL配制：高压灭菌琼脂和水后，将灭菌 20% 葡萄糖，V-B 培养基和组氨酸溶液加进热的琼脂溶液中。待溶液稍为冷却后，加入灭菌生物素，混匀，浇制平板。6.10.2 氨苄青霉素平板和氨苄青霉素/四环素平板 成分：琼脂粉 15 g 蒸馏水 940 mL