- ￥351
- 百生跃(Bioleaper)
- BR3319903
- 上海
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 供应商：
百生跃(Bioleaper)
- 英文名：
Sabouraud Agar Chloramphenicol Medium(SABC)
- 规格：
250g
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文献和实验/L碳酸钾溶液调pH到8.0.边搅拌边加入抗氯霉素MAb1.5mg，搅拌20min，再逐滴加入2ml25mg/ml聚乙二醇20000（PEG20000），搅拌15min.20000 r/ min离心15min，弃上清液，加入10mlpH7.4PBS缓冲液（含0.4mg/mlPEG）清洗2次。将沉淀用5ml含2%BSA的PBS缓冲液（Ph7.4）溶解，用0.22μm无菌过滤器过滤后，4℃保存备用。 3、样品制备 氯霉素标准样品配制 以甲醇配成100μg/ml标准贮液，后以超纯水稀释成各浓度
在制作酶谱、测定序列、制备探针等实验中需要高纯度、高浓度的质粒DNA,为此需要大量提取质粒DNA。许多年来，一直认为在氯霉素存在下扩增质粒只对生长在基本培养基上的细菌有效，然而在带有pＭＢl或ＣolEl复制子的高拷贝数质粒的大肠杆菌菌株中，采用以下步骤可提高产量至每500ml培养物２－５mg质粒ＤＮＡ，而且重复性也很好。1、 将30ml含有目的质粒的细菌培养物培养到对数晚期（OD600约0.6)。培养基中应含有相应抗生素，用单菌落或从单菌落中生长起来的小量液体闭关物进行接种。2、 将含相应抗生
酶作用下连接入载体。4. 获得含重组表达质粒的表达菌种① 将连接产物转化大肠杆菌 DH5α，根据重组载体的标志（抗 Amp 或蓝白斑）作筛选，挑取单斑，碱裂解法小量抽提质粒，双酶切初步鉴定。② 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确， 进入下步操作。否则应筛选更多克隆，重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。③ 以此重组质粒 DNA 转化表达宿主菌的感受态细胞。5. 氯霉素酰基转移酶重组蛋白的诱导① 接种含有重组氯霉素酰基转移酶蛋白的大肠杆菌 BL21 菌株于 5 mL LB 液体培养基中（含 100
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