m-TEC琼脂

AAV 在肾脏疾病研究中的应用

替代治疗或肾移植。肾脏纤维化是 CKD 患者几乎普遍存在的一种病理变化。已有研究结果显示 miR-29b 可以抑制肾纤维化，因此 miR-29b 替代疗法可能是肾纤维化治疗的有效方法。这篇文章主要研究 miR-29b 用于肾脏纤维化基因治疗的可行性。   实验设计 确定最适合肾脏靶向基因递送的 AAV 血清型。 体外实验：在正常大鼠成纤维细胞、NRK-49F、TEC 和 NRK-52E 细胞中评估 miR-29b 对 TGF-β1 诱导的肾细胞纤维化的影响。 体内实验：在 UUO 小鼠模型中评估 miR

如何做好 Southern 杂交？

体积的 0.5 M EDTA，以终止消化。然后用等体积酚抽提、等体积氯仿抽提，2.5 倍体积乙醇沉淀，少量 TE 溶解（参见 DNA 提取方法，但离心转速要提高到 12000 g，以防止小片段 DNA 的丢失）。如果需要两种酶消化 DNA，而两种酶的反应条件可以一致，则两种酶可同时进行消化；如果反应条件不一致，则先用需要低离子强度的酶消化，然后补加盐类等物质调高反应体系的离子强度，再加第二种酶进行消化。三、 基因组 DNA 消化产物的琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是目前分离核酸片段最常用的方法，制备

免疫沉淀反应（五）——火箭电泳实验

火箭电泳实际是一种定量免疫电泳。其原理为：在电场作用下，抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动，二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线，而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系，因此本法可以测定样品中抗原的含量。 一、材料 1. 诊断血清（抗体）：抗人IgG或IgA免疫血清。 2. 待检血清（抗原）：人血清。 3. 参考血清。 4. pH8.6，离子强度0.05 M 巴比妥缓冲液配制（见对流免疫电泳实验）。 5. 其它：琼脂粉，微量进样器，打孔