阴沟肠杆菌分离琼脂（ECIA）

噬菌体的分离与纯化

混浊的菌悬液变为澄清，此现象可指示有噬菌体存在；也可利用这一特性，在样品中加入敏感菌株与液体培养基，进行培养，使噬菌体增殖、释放，从而可分离到特异的噬菌体； (b)在有宿主细菌生长的固体琼脂平板上，噬菌体可裂解细菌而形成透明的空斑，称噬菌斑（图Ⅻ-1），一个噬菌体产生一个噬菌斑，利用这一现象可将分离到的噬菌体进行纯化与测定噬菌体的效价。 本实验是从阴沟污水中分离大肠杆菌噬菌体，刚分离出的噬菌体常不纯，如表现在噬菌斑的形态、大小不一致等，然后再作进一步纯化。 三、器材

噬菌体的检查及效价测定

、大小较一致，且清晰度高，故计数比较准确，因而被广泛应用。 三、材料： 1. 菌种： 敏感指示菌（大肠杆菌）、大肠杆菌噬菌体(从阴沟或粪池污水中分离)。 2. 培养基： 两倍肉膏蛋白胨培养液，上层肉膏蛋白胨半固体琼脂培养基（含琼脂0.7%，试管分装，每管mL），下层肉膏蛋白胨固体琼脂培养基（含琼脂2%），1%蛋白胨水培养基。 3. 仪器和器具： 无菌的试管、培养皿、三角瓶、移液管（1、5mL），恒温水浴锅，离心机、721分光光度计等。 四、流程： 1. 噬菌

手把手教你做好体外 DNA 重组

结果，做好记录。【注意事项】1. 溴化乙啶是致癌剂，并有中度毒性，实验中要戴防水手套，不要污染环境。紫外灯下观察结果时，应戴防护眼镜。2. 也可将溴化乙啶预先加入琼脂糖中，使浓度达 0.5 μg/mL 进行配胶。3. 琼脂糖的浓度一般用 0.8%~1.2% , 可随欲分离核酸分子的大小作调整，分子大用低浓度凝胶，分子小用高浓度胶。分离 RNA 时要用变性胶。（三）DNA 酶切片段的回收【实验方法与步骤】1. 冻融法:（1）在 UV 灯下，用手术刀片将含 DNA 片段的琼脂糖凝胶切下，-70 ℃ 冷冻至少