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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
37
- 英文名:
NCI-H2087
- 生长状态:
悬浮生长,有少数细胞疏松贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| NCI-H2087细胞 | T25瓶 | LZ-X968935 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| Primarker™小鼠肺动脉成纤维细胞鉴定试剂盒 | AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人细胞裂解液 (阳性对照) X-SA琼脂培养基shēng huà shì jì容量:RT1把/包 |
| Primarker™小鼠肾小球内皮细胞鉴定试剂盒 | 人骨髓间充质干细胞(hMSCs)新芒果苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Neomangiferin |
| MM, 小鼠小胶质细胞AGAROSESFR超高分辨率琼脂糖生物技术级25G | CTLA4 Others Mouse 小鼠 CTLA4 / CD152 人细胞裂解液 (阳性对照) 人造沸石Permutit质量规格:Tech Grade |
| 成人皮肤成纤维细胞取物【Human Skin: Normal Dermal Fibroblasts Derivatives】 | FAM171B Others Human 人 FAM171B / KIAA1946 人细胞裂解液 (阳性对照) 爱维莫潘质量规格:删除;精神管制Alvimopan |
| T84(人结肠腺癌肺转移细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤细胞(NK靶细胞);YAC-11,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品1,2,3,4,6-O-pentagalloylglucose | 人肾上腺皮质腺癌细胞;NCI-H295R莱苞迪甙D(标准品)Rebaudioside D质量规格:HPLC≥95.50%,标准品 |
| 小鼠胎儿表皮角质形成层细胞【Mouse Embryo: Normal Fetal Epidermal Keratinocytes】 | 人虹膜色素上皮细胞cDNAHIPEpiC cDNA甘氨酸Glycine质量规格:>99%,美仑 |
| 人肝星形细胞完全培养基 100mL葡聚糖凝胶 Sephade... Sephadex G-15 11081-40-6 25G 分离试剂 | IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人细胞裂解液 (阳性对照) 亚砜克林Clindamycin Sulfoxide |
| Primarker™小鼠输尿管上皮细胞鉴定试剂盒 | MDA-MB-175VII(人导管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 BRL 3A(大鼠肝细胞)氯化胆(来自牛脂)(>87.0%(GC))质量规格:>87.0%(GC)Cholesteryl Chloride from Beef Fat |
| 小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT 小鼠前脂肪细胞完全培养基 100mLD-Glucose-6-PhosphateNa2 100mg/500mg/1g/5g Sigma G7250 | MIF Protein Mouse 重组小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白氯化木兰花碱(标准品)Escholine chloride质量规格:HPLC≥98%,标准品 |
| NCI-H226(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2FMOC-3,5-二-L-酪氨酸FMoc-Tyr(3,5-I2)-OH质量规格:>98%,BR | L129细胞,NCTC克隆929细胞 人Butt`s瘤细胞,Raji细胞 小鼠小胶质细胞;BV2灵芝醛A(标准品)质量规格:HPLC≥95%,标准品Ganoderal A |
| 人正常前列腺上皮细胞;RWPE-12-溴-9-芴酮(>96.0%(GC))质量规格:>96.0%(GC)2-Bromo-9-fluorenone | 人肾皮质近曲小管上皮细胞;HK-2脲,尿素Urea质量规格:AR |
| HGFA Others Human 人 HGFA 人细胞裂解液 (阳性对照) 油酸甲酯(分析标准品,>99.0%(GC))Methyl oleate质量规格:分析标准品,>99.0%(GC) | 人腺病毒IgM酶联免疫试剂盒 |
| NCI-H2087细胞PLAU Others Human 人 Urokinase / PLAU (activated by ypsin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 异莲心碱(标准品)Isoliensinine质量规格:HPLC≥98%,标准品 | 人磷酸化乙酰辅酶A酶联免疫试剂盒 |
| HGC-27细胞,人未分化胃癌细胞 人神经母细胞瘤细胞,BE(2)-M17细胞 恒河猴肾细胞;RM-1五流化鳞(*)(XZ) pqntcsulfidq | 人肝脏型脂肪酸结合蛋白酶联免疫试剂盒 |
| 人胎盘绒毛膜细胞完全培养基 100mLN-氧基奥氮平Olanzapine N-Oxide | 人自身抗体酶联免疫试剂盒 |
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文献和实验都是贴壁细胞,在消化传代过程中,步骤如下:倒尽旧的培养液->用无血清的培养基清洗一两次->加入一定量的胰酶,置于37度培养箱中5--10分钟,使细胞悬浮->显微镜下观察,待细胞大部分变圆时,回到超静台->加入一定量的含血清的新培养液,以终止胰酶作用->反复吹打细胞->再置显微镜下观察,直到细胞全部悬浮起来->吸出一部分加入新的培养瓶中->最后再补充加入一定量新的培养液。注意: 1、吹细胞时尽量多吹边角儿,此处细胞生长的多。2、吸出细胞前要混匀,可以剧烈震荡培养瓶。3、我们用的是DMEM
一、实验材料NCI-H1299,购自上海晶莱生物技术有限公司。表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家(货号)细胞培养瓶FALCON 中国(353014)Penicillin/streptomycin solution(KGY002)0.25% Tripsin-EDTA(BK-E3076)PBS(BK330-2)胎牛血清GIBCO 美国(10270-106)1640 培养基Hyclone 美国(SH3080901)Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 二、实验仪器表 2.2.1 主要
potential loss and cell cycle arrest》的论文。文章了评估 epicatechin 对 NCI-H2172 非小型细胞肺癌细胞的抗癌作用,重点观测其对自噬细胞死亡、线粒体膜电位 (m) 丧失和细胞周期阻滞的影响。图片来源于 Molecular Medicine Reports 官网然而,就在发表后的第二天,PubPeer 网站上的匿名网友指出,文章 Fig4 中的多个细胞为复制细胞。匿名网友指出,相同颜色圈出的细胞是相同的细胞。图片来源于 PubPeer 官网,相同圈中细胞
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