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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
58
- 英文名:
HARA-B
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| HARA-B细胞 | T25瓶 | LZ-X8767 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人细胞裂解液 (阳性对照) | 茜素黄R Alizarin yellow R 22437 25G 通用试剂 |
| 人胚胎绒毛膜细胞培养试剂盒 人胚胎绒毛膜细胞培养试剂盒 试剂盒 | 改良EC(mEC+n)肉汤9ml*20支/包用于O择性增菌 |
| RKO-AS45-1 人结肠癌转基因细胞 1ml/T75 | 宛氏拟青霉 英文名; Paecilomyces variotii 规格; 冻干粉 洋葱伯克霍尔德氏菌 Burkholderia cepacia│(Palleroni and Holmes) Yabuuchi et al 冻干粉 30℃;18-24h;好氧; 米曲霉 Aspergillus oryzae (Ahlburg) Cohn 模式菌株 no 28℃;5-7天;好氧 |
| Psi2 DAP 小鼠胚胎成纤维细胞 | Yttriumoxide钇氧10克BR,97% |
| 人支气管平滑肌细胞培养试剂盒 人支气管平滑肌细胞培养试剂盒 试剂盒 | PBS-Tween20洗液 PBS-Tween20 lotion 大肠杆菌O157免疫磁珠试验的洗液 |
| TE-1(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | 碱性碳酸5克RT |
| K-562 人慢性髓原白血病细胞 | 40邻本二二正辛酯;本二二辛酯;邻酞酸二正辛酯Dinoctyl ophthalate;DOP |
| CLIAKitforUGCG(HumanUDP-glucoseceramideglucosylansferase)ELISAKit人尿苷二0酸糖神经酰胺糖基转移酶规格:48T/96T | 鸡球菌 英文名; Staphylococcus gallinarum 规格; 冻干粉 产氮假单胞菌 Pseudomonas azotoformans 冻干粉 28℃,24-48h,好氧 还原亚硝酸盐寡养单胞菌 Stenotrophomonas nitritireducens 模式菌株 no 28℃;5-7天;好氧 |
| WISH(人羊膜细胞) 5×106cells/瓶×2 | 玻璃纤维shēng huà shì jì容量:100克 |
| HCC1937 人癌细胞 | N苄氧羰基L缬酸,英文名或英文缩写:NCBZLValine,级别:BR,98.5%,规格:5克 |
| CLIAKitforVC(HumanVitaminC)ELISAKit人维生素C规格:48T/96T | 啶酸 10mg/支*5 每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB标准) |
| 大鼠上腺嗜鉻细胞瘤细胞(高分化) 英文名称: PC-12(高分化) | MLCB天培地 250g 用于沙门氏菌分离培养 |
| HARA-B细胞HLCL 9C3 人类淋巴母细胞瘤细胞 1ml/T75 | 3Chloro4metxylthiopxene2carbohydrazide 5 |
| 免疫印迹HRP-TMB底物显色试剂盒10次 | 顺丁希二酸钠250毫克2~8℃ |
| 雪旺氏细胞 1×106 5×106 | 氧烷与聚氧烷 VINYL TqRMINcTqD POLYDIMqTHYLSILOXcNq 083 |
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文献和实验B 细胞抗原受体 B细胞抗原受体(BCR)具有抗原结合特异性,在同一个体内,其多样性高达109 ~1012 ,构成容量巨大的BCR库,赋予个体识别各种抗原、产生特异性抗体的巨大潜能。 在成熟B细胞表面,Iga、Igp总是和BCR共同表达,形成BCR-Igα/Igβ复合体,前者识别抗原,后者转导BCR接受的抗原刺激信号。 (一)BCR分子 BCR主要包括mlgM和mlgD,由两条重链
B细胞可通过BCR结合抗原并发生胞吞(cndocytosis)摄人BCR-Ag复合物。在抗原加工区室CⅡV中,抗原被降解成肽段,然后抗原肽与进入区室的MHCⅡ类分子结合,表达于B细胞表面并提呈给CD4T细胞。需要指出的是,B细胞以其BCR识别的抗原表位不同于它提呈的供T细胞识别的表位,两者分别来自半抗原和与之结合的载体蛋白(图1-1),也可以来自同一抗原分子的B表位和T表位。而且,B细胞与其他APC相比,有以下特点:①对抗原的识别和结合显示特异性。这保证了B细胞激活后最终产生的抗体能与相应
B细胞的增殖与分化在外周淋巴组织中进行。其中,包括B细胞进入B细胞区、识别抗原、与T细胞发生相互作用、出现增殖性原发灶、形成生发中心,并在生发中心中完成抗体亲和力成熟及类别转换,最终形成浆细胞及记忆B细胞。 B细胞可以经过两种途径进入外周淋巴结,一是经由输入淋巴管,二是穿越位于淋巴结中的HEV。下面将要提到,HEV位于T细胞区,该区中的基质细胞、HEV内皮细胞以及DC可以分泌特定的趋化因子,但末被抗原激发的B细胞不表达相应的受体,因而不会停留于T细胞区
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