甘油三酯(TG)含量试剂盒

甘油三酯(TG)含量试剂盒

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  • ¥490
  • wksubio
  • WS0190F
  • 国内
  • 2025年11月20日
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    • 英文名

      Triglyceride (TG) content test kit

    • CAS号

      WS0190F

    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      上海瓦兰生物

    • 保存条件

      4℃

    • 规格

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    甘油三酯(triglyceride, TG)含量试剂盒说明书
    (货号:WS0190F 分光法 48 样)
    一、产品简介:
    甘油三酯(TG)是三分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要
    成分,也是重要呼吸底物。
    甘油三酯(TG)被脂蛋白脂肪酶水解为甘油和游离脂肪酸。甘油接着被甘油激酶(GK)
    的催化生成甘油-1-磷酸(G-1-P)G-1-P 被甘油磷酸氧化酶(GPO)氧化生成过氧化氢
    (H2O2)(H2O2)4-氨基氨替吡啉等反应生成红色醌类化合物,其在 510nm 处有特征吸
    收峰,通过检测 510nm 处吸光值即可得出 TG 含量。
    二、试剂盒的组分与配制:
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 60mL×1
    4℃保存
    试剂一
    粉剂 mg×1
    4℃保存
    用前甩几下使试剂落入底部,再加
    2.2mL 蒸馏水,充分震荡溶解备用。
    试剂二
    液体 18mL×1
    4℃保存
    试剂三
    粉剂 mg×1
    -20℃保存 用前甩几下使试剂落入底部,再
    2.1mL
    蒸馏水,充分震荡溶解备用
    试剂四
    液体 12mL×1
    4℃保存
    标准品
    液体 1mL×1
    4℃保存
    三、所需的仪器和用品:
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、可调式移液枪、水浴锅、离心机、
    研钵、蒸馏水。
    四、甘油三酯(TG)含量测定:
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
    样本和试剂浪费!
    1、样本制备:
    ① 组织样本:
    称取约 0.1g 组织样本加入研钵中,加入 1mL 提取液,在冰上进行匀浆,12000rpm
    4℃或室温离心 10min,取上清液待测。
    【注】:若组织样本为高脂样本或部分为高脂样本,需用无水乙醇进行提取。
    ② 细菌/细胞样本:
    先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
    提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
    12000rpm 4℃或室温离心 10min,取上清,置冰上待测。
    【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(104):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。
    ③ 液体样本:澄清的液体样本直接测定,若浑浊则离心后取上清检测。
    2、上机检测:
    ① 可见分光光度计预热 30min,调节波长到 510 nm,蒸馏水调零。
    ② 所有试剂解冻至室温(25℃)。
    ③ 在 EP 管中依次加入:本试剂盒仅供科研使用
    2
    试剂名称(
    μL
    测定管
    标准管
    (仅做一次)
    空白管
    (仅做一次)
    标准品
    60
    样本
    60
    试剂一
    40
    40
    40
    试剂二
    340
    340
    400
    试剂三
    40
    40
    40
    试剂四
    220
    220
    220
    混匀,室温(25℃)避光孵育 20min,全部液体转移至 1mL 玻璃
    比色皿(光径 1cm)中,于 510nm 处比色,读取各管 A 值。
    【注】1. 若测定管的 A 值大于 0.5,则需将样本进行稀释(用提取液稀释)或减少样本加样量 V1(如
    减至 40μL,则试剂二相应增加),稀释倍数 D 或样本量 V1 需代入计算公式重新计算。
    2. 若样本为血清,蛋黄(需用乙醇提取)等高 TG 样本,可把样本 V1 降为 10μL,另用 50μL
    蒸馏水补齐,再按照上述加样表操作测定,则改变后的 V1 需带入公司计算。
    3. 若样本自身含有高的甘油背景值或者含有高的抗氧化物质(如 VC 等),需要增设一个样本
    自身对照(即 60μL+340μL 试剂二+40μL 试剂三+220μL 试剂四,避光反应 20min510nm
    读取吸光值 A),测定管减去对照管,代入计算公式计算。
    五、结果计算:
    1、按样本质量计算:
    TG(μg/g 重量)=(C 标准×V2) ×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(W×V1÷V) ×D
    =500×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ÷W×D
    2、按细胞数量计算:
    TG(μg/104 cell)=(C 标准×V2) ×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(500×V1÷V) ×D
    =(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ×D
    3、液体中 TG 含量计算:
    TG(μg/mL)=(C 标准×V2)×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷V1×D
    =500×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)×D
    TG(mmol/L)=(C 标准×V2) ×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷V1÷Mr×D
    =0.782×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)×D
    C 标准---标品浓度,0.5mg/mL=500μg/mL
    Mr---甘油三酯分子量,639
    V---提取液体积,1mL
    V1---样本加入体积,0.06mL
    V2---标准品加入体积,0.06mL
    D---稀释倍数,未稀释即为 1
    500---细胞数量;
    W---样本取样质量,g

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