本试剂盒仅供科研使用
甘油三酯（triglyceride, TG）含量测定试剂盒说明书
（货号：WS0190W 微板法 96 样）
一、产品简介：
甘油三酯（TG）是三分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不仅是细胞膜的主要成
分，也是重要呼吸底物。
甘油三酯（TG）被脂蛋白脂肪酶水解为甘油和游离脂肪酸。甘油接着被甘油激酶(GK)
的催化生成甘油-1-磷酸(G-1-P)。G-1-P 被甘油磷酸氧化酶(GPO)氧化生成过氧化氢
(H2O2)，(H2O2)与 4-氨基氨替吡啉等反应生成红色醌类化合物，其在 510nm 处有特征吸
收峰，通过检测 510nm 处吸光值即可得出 TG 含量。
二、试剂盒的组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 100mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
粉剂 mg×1 支
4℃保存
用前甩几下使试剂落入底部，再加
2.2mL 蒸馏水，充分震荡溶解备用。
试剂二
液体 10mL×1 瓶
4℃保存
试剂三
粉剂 mg×1 支
-20℃保存 用前甩几下使试剂落入底部，再
加
2.1mL
蒸馏水，充分震荡溶解备用
。
试剂四
液体 6mL×1 瓶
4℃保存
标准品
液体 1mL×1 支
4℃保存
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、可调式移液枪、水浴锅、离心机、研钵、蒸馏水。
四、甘油三酯（TG）含量测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
① 组织样本：
称取约 0.1g 组织样本加入研钵中，加入 1mL 提取液，在冰上进行匀浆，12000rpm，4℃
或室温离心 10min，取上清液待测。
【注】：若组织样本为高脂样本或部分为高脂样本，需用无水乙醇进行提取。
② 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；
12000rpm 4℃或室温离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
③ 液体样本：澄清的液体样本直接测定，若浑浊则离心后取上清检测。
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min，调节波长到 510 nm。
② 所有试剂解冻至室温（25℃）。
③ 在 96 孔板中依次加入：本试剂盒仅供科研使用
2
试剂名称（
μL）
测定管
标准管
（仅做一次）
空白管
（仅做一次）
标准品
20
样本
20
试剂一
20
20
20
试剂二
80
80
100
试剂三
20
20
20
试剂四
60
60
60
混匀，室温（25℃）避光孵育 30min，于 510nm 读取各管 A 值。
【注】1. 若测定管的 A 值大于 0.3，则可将样本进行稀释（用提取液稀释）或减少样本加样量 V1（如
减至 10μL，则试剂二相应增加），稀释倍数 D 或样本量 V1 需代入计算公式重新计算。
2. 若样本为血清，蛋黄（需用乙醇提取）等高 TG 样本，可把样本 V1 降为 2.5μL，另用 17.5μL
蒸馏水补齐，再按照上述加样表操作测定，则改变后的 V1 需带入公司计算。
3. 若样本自身含有高的甘油背景值或者含有高的抗氧化物质（如 VC 等），需要增设一个样本
自身对照（即 20μL+100μL 试剂二+20μL 试剂三+60μL 试剂四，避光反应 20min,510nm 读
取吸光值 A），测定管减去对照管，代入计算公式计算。
五、结果计算：
1、按样本质量计算：
TG(μg/g 重量)=(C 标准×V2)×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(W×V1÷V) ×D
=500×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ÷W×D
2、按细胞数量计算：
TG(μg/104 cell)=(C 标准×V2)×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(500×V1÷V) ×D
=(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ×D
3、液体中 TG 含量计算：
TG(μg/mL)=(C 标准×V2) ×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷V1×D
=500×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)×D
TG(mmol/L)=(C 标准×V2) ×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷V1÷Mr×D
=0.782×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)×D
C 标准---标品浓度，0.5mg/mL=500μg/mL； Mr---甘油三酯分子量，639；
V---提取液体积，1mL；
V1---样本加入体积，0.02mL；
V2---标准品加入体积，0.02mL；
D---稀释倍数，未稀释即为 1；
500---细胞数量；
W---样本取样质量，g。
文献和实验
