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- ALD0256
- 2025年07月05日
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20mg
货号：ALD0256
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文献和实验后的上清）每个样品做两个复孔。 20 倍稀释法：取 19 μLPBS+1 μL 样品上清，每个样品做两个复孔。 一般细胞蛋白适用于 10 倍稀释法，组织蛋白适用于 20 倍稀释法，总体积为 20 μL。 3) BCA 试剂的配制：BCA A 液：B 液比例为 50：1，此试剂现配现用，注意勿被其他蛋白污染。 4) 待标准曲线和样品复孔加样后，每孔加入 200 μL 的 BCA 混合试剂，置于 37 ℃ 温箱内 15 min。用酶标仪在 568 nm波长下测得 OD 值。测得的标准曲线 OD 值按浓度
，可通过绘制标准曲线求出标本中E2F1 浓度。 试剂盒组成 （ 2-8 ℃保存） 酶标 板 （Coated Wells ） 96 孔 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate ） 12ml
抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么 ELISA 反应总是需要一定时间的温育。 温育常采用的温度有 43℃、37℃、室温和4℃（冰箱温度）等。37℃ 是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立 ELISA 方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在 37℃ 经 1-2 小时，产物的生成可达顶峰
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