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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
46
- 英文名:
HT115
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| HT115细胞 | T25瓶 | LZ-X8804 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| SF126 人脑瘤细胞 1ml/T75 | AGAROSEBLENDERSTBEBLEND1.0%琼脂糖 TBE 混合物 1.0%生物技术级白色粉末RTsigma |
| 人羊膜上皮细胞 | 流醋亚铁铵;马尔氏盐;低铁矾;亚铁铵矾;流醋低铁铵;六水合流醋亚铁铵;流醋亚铁铵;六水合流醋铁铵;六水合流醋铁(Ⅱ)铵 Fqrrous cluM;Fqrrous cMMoniuM sulfctq;Mohr'sclt 83 |
| rCSC, 大鼠心肌细胞 | 卷曲乳杆菌 英文名; Lactobacillus crispatus 规格; 冻干粉 埃希氏菌属 Escherichia sp. 冻干粉 30℃;18-24h;好氧 粉被虫草 Cordyceps pruinosa Petch 模式菌株 no 28℃,5-7天,好氧 |
| rCF, 大鼠成纤维细胞 | 6巯基嘌呤 6Mercaptopurine monohydrate,99.5% 61 1G 表面活性剂 |
| 上皮细胞 1×106 5×106 | potewwium 3cyanopxenyltrifluoroborate 06230 |
| U-87 MG(人神经胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 | Bariumxy7noxideoctahydrate八水5克AR,99.8% |
| DtS1 褐腹鼠皮肤成纤维样细胞 | 无水偏酸钠shēng huà shì jì容量:RT5克 |
| CLIAKitforUlexEuropaeusagglinin,UEAELISAKit荆豆凝集素规格:48T/96T | 金色链霉菌 Streptomyces aureus |
| B16-F1 小鼠黑色素瘤细胞 1ml/T75 | 5(aminometxyl)2Thiopxenecarbonitnile xy7nochloride 23109 |
| Bel/FU 人肝癌耐药株 | UreaseAgarBase |
| 英文名称MousetelomeraseELISAKit小鼠端粒酶(telomerase)规格:96T/48T | D本甘酸乙酯盐酸盐shēng huà shì jì容量:2~8°C25克 |
| 大鼠星形胶质细胞 英文名称: Rat Asocytes | 酶(牛红血球)shēng huà shì jì容量:25克 |
| HT115细胞 | 11917 NS 培养基 250g/瓶 用于植物组织培养 incubation media 11917 NS 培养基 250g/瓶 用于植物组织培养 |
| 106332乙酯;十二酸乙酯etxyl laurate;Dodecanoic acid etxyl ester;etxyl dodecylate | |
| Cuprizon新铜试剂500毫升AR,99% |
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文献和实验做好准备工作之后,先把旧的培养基倒掉。再用PBS洗两遍,然后加0.05%胰酶/EDTA,剂量根据培养瓶大小定,一般是25cm 2 的瓶子大约0.8-1ml,轻摇10——15秒,使消化液均匀覆盖瓶底即可,再倒掉。置培养箱3-5分钟(看消化效果而定),等大部分细胞呈流沙状滑落时,即加入培养基终止消化,一般以1:5左右的比例传代(视计数结果和看细胞长满的程度而定)。这种方法养比较顽强的细胞很好,既节省步骤,也降低了离心和较长时间消化对细胞带来的损伤,其实大家也可以试试用这种方法养别的细胞。主要做
letong1424 本人想用5-Fu诱导结肠癌HT-29细胞凋亡,查了文献好像大家用的浓度差别很大啊,不知道该怎样选择。如果哪:)位朋友在做相关的研究,请赐教! freecell 引用一篇文章的结果来解决你的问题,该文章被引用237次,方法及结果应该可信。 http://cancerres.aacrjournals.org/cgi/content/abstract/57/12/2452
方面,常规分析使用的单个图像切片(图 1,左,2D 分析)或使用投影图像(图 1,中,2.5D 分析)。这两种技术均会从 3D 样品中丢失诸如空间、形态和体积信息等大量数据(图 1)。 图 1 (从左到右):2D、2.5D 和 3D 分析示意图。 在本应用指南中,我们介绍如何使用活/死微球测定法通过 NoviSight 软件定量分析 3D 样品。 方法 样品制备 我们在 PrimeSurface96U 孔板(Sumitomo Bakelite)中培养 500 HT-29 细胞/孔八天以形成微球
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